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PROTOZOOLOGIA



43 tesis en 3 páginas: 1 | 2 | 3
  • ANÁLISIS DE LA INTERACCIÓN ENTRE METALES PESADOS (CD, ZN, CU) Y PROTOZOOS CILIADOS: EVALUACIÓN TOXICOLÓGICA, BIOACUMULACIÓN Y METALOTIONEINAS .
    Autor: DÍAZ DEL TORO SILVIA.
    Año: 2003.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA.
    Centro de realización: FAC. BIOLOGÍA UCM.
    Resumen: En este trabajo de tesis doctoral se analizan diversos aspectos de la interacción entre los protozoos ciliados y determinados metales psados (Cd, Zn y Cu). Se han utilizado 6 cepas de diferentes géneros y especies de ciliados, aislados de ecosistemas acuáticos y edáficos contaminados o no con metales pesados. Se han estudiado los parámetros ecotoxicológicos relativos a estos tres metales pesados, y a mezclas de los mismos. Se ha analizado la capacidad de bioacumulación para estos metales pesados en diversos ciliados, y se han detectado acumulos metalicos aplicando, por primera vez en ciliados, técnicas fluorescentes. Por otro lado, se ha llevado a cabo un estudio de proteínas potencialmente queladoras de Cd/Zn (proteínas ricas en grupos tiólicos como las metalotioneinas), llegándose a aislar y secuenciar parcialmente una Cd-MT. Además, se han aislado, clonaod y secuenciado tres isoformas génicas de Cd-MT, de las cuales una de ellas (MTB) es completamente nueva. Estos genes presentan un elevado conservadurismo en la secuencia aminoacídica, entre ciliados filogenéticamente muy distantes. Se ha realizado un análisis, tanto de las secuencias aminoacídicas inferidas. Todos estos resultados pueden contribuir en un futuro próximo al diseño de biosensores celulares y/o promotores moleculares, para la detección de estos agentes tóxicos en diferentes ecosistemas.
  • ESTUDIO FAUNÍSTICO ECOLÓGICO DE LAS COMUNIDADES DE PROTOZOOS CILIADOS DEL PERIFITON DE LAS LAGUNAS DE CARREGAL Y VIXÁN (PARQUE NATURAL "COMPLEJO DUNAR DE CORRUBEDO") .
    Autor: SANTAMARÍA ESTÉPAR PEDRO OSCAR.
    Año: 2002.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA.
    Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA - USC.
    Resumen: A pesar del importante papel ecológico que juegan los protozoos ciliados en los niveles inferiores de las cadenas de nutrientes de los ecosistemas acuáticos, tanto marinos como dulceacuícolas, es muy escaso el conocimiento que actualmente se tiene sobre los protozoos ciliados que viven en el perifiton de ecosistemas salobres. De hecho, en este trabajo, que representa el primer estudio de estas características en España, se analizan, tanto desde un punto de vista faunistico como ecológico, las comunidades de protozoos ciliados que viven en el perifiton de dos lagunas del Parque Natural de Corubedo, las cuales por sus características fisicoquímicas y geomorfológicas responden a cada uno de los dos modelos de ecosistemas lacustres salobres existentes en la parte sur del Complejo Dunar de Corrubedo, está aislada del mar por una barrera continua de arena de unos 200 metros, por lo que presenta una baja salobridad (0,5-5por mil), exhibiendo un régimen tranquilo, sin oscilaciones continuas del nivel de agua a causa de las mareas, ni una mezcla directa con el mar. La Laguna de Carregal ("Modelo de "Laguna Mareal o Laggon"), al estar comunicada con el mar de forma permanente por medio de un canal, está influenciada de manera constante por el régimen de mareas y corrientes, lo que da lugar a cambios muy significativos del volumen de agua (oscilaciones mareales), así como a rápidas e intensas variaciones de los parámetros fisicoquímicos, especialmente de la salinidad, que es por lo general bastante elevada (8-37 por mil). Las comunidades fueron estudiadas a partir de muestras recogidas mensualmente durante 1996. La identificación de los ciliados se realizó en vivo, calculándose la abundancia a partir de submuestras fijadas con Cl2Hg, mediante el método LDM (Lackey, 1938; A.P.H.A., 1998). La biomasa de cada especie de ciliado se estimó a partir de su biovolumen celular, utilizando un factor de conversión de 0,6 pg.peso seco/um3. El volumen celular se calculó a partir de las fórmulas matemáticas de figuras geométricas estándar o combinaciones de las mismas, a la scuales cada especie de ciliado más se asemeja. Los resultados obtenidos fueron analiazdos estadísticamente mediante métodos Normalizados (ANOVA), métodos No-Paramétricos y métodos Robustos. CARACTERÍSTICAS DE LAS COMUNIDADES A lo largo del periodo de estudio se identificaron un total de 79 especies de ciliados libre-nadores, 66 en la laguna de Carregal y 60 en la de Vixán (46 comunes). Estas microbiocenosis presentan una composición características y muy diferente de la de otras comunidades dulceacuícolas, marinas o edáficas, siendo la salinidad el factor que más influye en la mayor o menor presencia de especies típicas estos ecosistemas en las lagunas estudiadas. Las especies Chlamydonella pseudochilodon, Kabliella leptocirra y Dysteria kahli se citan por primera vez en el periton de aguas salobres. Además, estas dos últimas especies se describen por primera vez fuera del Mar Negro. Se describe una nueva especie de ciliado; Lacrymaria sp.: si bien su estudio no está totalmente concluido, todos los ejemplares observados se diferencian del resto de especies del género Lacrymaria descritas hasta la fecha por la presencia de dos macronúcleos elipsoides, 1 vacuola contráctil terminal, forma lanceolada, tamaño (117-160 um) y hábitat (perifiton salobre). Gran parte de las especies, presentan una serie de adaptaciones y/o estructuras especializadas para la adhesión temporal al perifiton como son: A,- Cierto grado de aplanamiento, tanto dorsoventral como lateral. B,- Carácter tigmotáctico. C,- Presencia de pedúnculos y orgánulos adhesivos en el extremo posterior. D,- Tamaño menor al descrito en poblaciones dulceacuícolas. ABUNDANCIA, BIOMASA Y DINÁMICA ESTACIONAL Estas comunidades están representadas por una mayoría de "especies raras" de aparición puntual, siendo sólo unos pocos ciliados, que alcanzan una gran abundancia, los que forman parte del "componente residente". Muestran dinámicas con máximos de abundancia y biomasa con el perifion que tienen lugar al comienzo de la primavera y/o en el verano, coincidiendo su mayor desarrollo con los periodos de mayor Tª del agua y/o de menor potencial redox. En las lagunas estudiadas los ciliados alcanzan algunas de las densidades más elevadas que han sido descritas en los diferentes ecosistemas naturales estudiados hasta la fecha; sin embargo su biomasa es menor a la observada en otros ecosistemas igual o incluso menos productivos como el perifiton dulceacuícola, dada la gran abundancia de ciliados de pequeño tamaño (bacterívoros). GRUPOS TAXONÓMICOS REPRESENTADOS En el perifiton están presentes una gran cantidad de grupos diferentes de ciliados de vida libre, que abarcan prácticamente toda la taxonomía de estos protistas. No obstante, los escuticociliados, hipotricos, citrofórido, oligotricos, prostomátidos y pleurostomátidos son los grupos más representativos dada su riqueza de especies y abundancia. El perifiton de estas lagunas ofrece un mayor número de nichos para los ciliados más pequeños (
  • AISLAMIENTO, PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE LAS PROTEÍNAS CAPACES DE LIGAR LOS ÁCIDOS GRASOS EN LEISHMANIA DONOVANI .
    Autor: MAACHE MIMOUN.
    Año: 2002.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: CIENCIAS .
    Centro de realización: INSTITUTO DE BIOTECNOLOGÍA.
    Resumen: En esta tesis se ha comprobado la presencia de las proteínas ligadoras de ácidos grasos (FABP) en leishmania donovani. Un tema de gran actualidad, debido a su posible uso en el diagnóstico y como vacuno contra las enfermedades causadas por parásitos. Así como la posible intervención de estas proteínas en un tratamiento selectivo dada la incapacidad de síntesis de novo de ácidos grasos por parte de estos organismos. Se ha llevado a cabo este trabajo con la forma promastigote del parásito y mediante cromatografía de afinidad se ha conseguido purificar las FABPs de Leishmania (Leish-FABP) caracterizándose mediante técnicas electroforéticas en SDS-PAGE y en IEF se determinó su peso molecular y su punto isoeléctrico (pI). Las reacciones positivas demostradas frente a varios sueros con leishmaniosis de origen humano y animal y la inexistencia de reacciones cruzadas frente a otros microorganismos intracelulares (Trypanosoma cruzi, Toxoplasmosis, Sífilis, Tuberculosis) nos induce a considerar a estas proteínas como antígenos específicos en el diagnóstico de la leishmaniosis. La creacción de anticuerpos (anti-FABP) en ratones ha permitido utilizar varias técnicas de inmunolocalización como la inmunofluorescencia y la inmunocitoquímica por las cuales se ha comprobado la amplia distribución de la proteínas en el parásito. Para determinar el fragmento inmunogénico se ha tratado la proteína con varias enzimas como proteinasaA y algunos reactivos químicos como N-Chlorosuccinamida, mostrando por lo menos dos fragmentos antigénicos. Para comprobar la capacidad de la proteína en inducir respuesta inmunitaria y estudiar el tipo de la respuesta inducida se ha estudiado en varios lotes de ratones Balb/c (infectados y previamente inmunizados, infectados y sanos) estudiándose tanto los niveles de inmunoglobulinas (IgG1, IgG2 y IgG3) como los niveles de citoquinas (IL-2, IL-4, IL-10 y IFN-gamma) comprobándose que los niveles de inmunoglobulinas como los de citoquinas dependientes de respueta Th1 son muy altos en los ratones previamente inmunizados comparándolos con los otros ratones (infectados y sanos). Comprobándose así mismo que en el lote de ratones previamente inmunizados el porcentaje de reducción de la parasitación (índice de Leishman) era del 93.46% indicando que la Leish-FABP muestra una capacidad protectora siendo susceptible de ser usada como antígeno de vacunación.
  • REGULACIÓN DE LA INDUCCIÓN DE LA ARGINASA EN LEISHMANIOSIS EXPERIMENTAL MURINA Y SU PAPEL EN LA INFECCIÓN IN VITRO E IN VIVO POR LEISHMANIA SPP.
    Autor: INIESTA OROZCO VIRGINIA .
    Año: 2002.
    Universidad: EXTREMADURA.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: En el presente trabajo se ha pretendido realizar un estudio en profundidad de la función de la enzima arginasa en el modelo experimental murino en la infección con Leishmaniosis para ello se han llevado a cabo una serie de estudios in vitro en macrófagos diferencaidos de médula ósea procedentes de ratones sensibles y resistentes al parásito. La conclusión fundamental de nuestros ensayso in vitro es que la activación de la enzima arginasa en el macrófago por citoquinas TH2 tiene como consecuencia la generación de un estado de permisidad a la infección en dicha célula, debido a que se originan poliaminas esenciales que el parásito utiliza para proliferar. El estudio del papel que la arginasa desempeña en la infección por leishmania se completó con una serie de ensayos in vivo llevados a cabo mediante el análisis comparativo en ambas cepas murivas (Sensibles y Resistentes). La conclusión es que la arginasa 3 desempeña una función clave en el desarrollo de la infección por Leishmania en los animales, pudiendo considerarse su inducción como un posible marcador de proliferación parasitaria.
  • AISLAMIENTO, PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE UNA SUPERÓXIDO DISMUTASA DE TRIPANOSOMÁTIDOS DE PLANTAS (PHYTOMONAS AISLADAS DE EUPHORBIA CHARACIAS) .
    Autor: MARIN SÁNCHEZ CLOTILDE .
    Año: 2002.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Resumen: Esta Tesis es un intento por resolver el problema de la identificación y diagnóstico del género Phyotmonas, que son protozoos parásitos de plantas. Y que, en cultivos tropicales americanos (cafetal, coco, palma aceitera, mandioca) tienen consecuencias devastadoras por las pérdidas económicas que originan y las consecuencias ecológicas que conllevan, debido a que no existe tratamiento frente a estas infecciones y sólo se puede tratar con insecticidas de forma intensiva. En España el grupo de Parasitología ha aislado estos parásitos en cultivos de tomate, mango y chirimoyo, y en otras plantas circundantes a los cultivos que actuarían como reservorios (trébol y bledo), y por los estudios ya realizados son iguales a los americanos, por lo que piensan, que estos parásitos han sido introducidos en nuestro país por medio de semillas o plántulas importadas desde América. Con lo que estamos ante una infección emergente y totalmente desconocida, que lo primero que necesitará será poder ser diagnosticada. Por ello se está buscando el marcador molecular que lo permita. La enzima superóxido dismutasa en Phytomonas tiene dos isoformas: SODI y SODII, que han sido purificadas y caracterizadas, y que según los resultados permiten la identificación de estos protozoos, tanto por, su perfil isoenzimático como por, la propiedad inmunogénica que solamente está presente en la isoenzima SODII. Con lo que la enzima SOD sería una herramienta para la identificación, diagnosis de estas parasitosis. Pero además, la SOD es una reconocida diana quimioterapéutica, por lo que, las enzimas purificadas serían útiles para el diseño de drogas dirigidas al control de estas enfermedades.
  • UN NUEVO CÓDIGO GENÉTICO NUCLEAR NO CANÓNICO: TRADUCCIÓN DE CODONES UAA POR GLUTAMATO EN CILIADOS PERITRICOS .
    Autor: SÁNCHEZ SILVA ROCIO.
    Año: 2002.
    Universidad: SEVILLA.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA .
    Centro de realización: INTERDEPARTAMENTAL.
    Resumen: Los códigos genéticos variantes descritos hasta la fecha en ciliados muestran las mismas características: traducción de uno (UGA) o dos (UAR) de los tres codones STOP universales por un aminoácido determinado. En algunos géneros, tales como Oxytricha, Paramecium y Tetrahymena, los codones UAR son t raducidos por glutamina, UGA es traducido por cisteína en Euplotes y por triptófano en Colpoda inflata y Blespharisma americanum. El objetivo principal de mi tesis es el análisis de las características del código genético utilizado por los ciliados peritricos. Para ello se ha llevado a cabo un análisis molecular de actina y alfa-tubulina, dos proteínas bien conservadas entre los eucariotas, de hecho tal es su conservación que se han utilizado como marcadores para la construcción de árboles filogenéticos. Los alineamientos tanto a, nivel de nucleótidos como de aminoácidos de ambas proteínas no suelen presentar ningún tipo de ambigüedad. Se han amplificado y clonado varias secuencias de ADN que representan aproximadamente un 95% y un 85% de genes típicos de actina y alfa-tubulina en los ciliados peritricos Opisthonecta henneguyi, Opisthonecta matiensis y Vorticella microstoma. Los genes actina de estos ciliados, presentan pequeñas inserciones interrumpiendo la región codificante. Dichas inserciones no están presentes en el ARNm demostrando así que son intrones. El análisis de las secuencias de aminoácidos deducidas de las secuencias de nucleótidos de los genes actian y alfa-tubulina indican que los ciliados peritricos traducen los codones UAA y probablementeUAG por glutamato. La traducción de un codon STOP por un aminoácido determinado involucra cambios en la maquinaria de traducción. En T.thermophila se han identificado ARNt con anticodones UUA y CUA respectivamente, los cuales son los encargados de traducir los codones UAR por glutamina en dicha especie. Consecuentemente, se han caracterizado los ARNtGlu en ciliados peritricos y se han identificado ARNtGlu UUA al menos en O.matiensis y V.microstoma. Por tanto, demostramos que la traducción de los codones UAA por glutamato en ciliados peritricos está mediada por un ARNt con anticodon UUA. Este código genético descrito en ciliados peritricos no se ha identificado con anterioridad en ningún organismo vivo. A continuación, se llevo a cabo un análisis filogenético utilizando como marcador alfa-tubulina, para determinar la posición de los ciliados peritricos y ubicar filogenéticamente el nuevo código genético. Los análisis filogenéticos corroboraron que los ciliados peritricos, los peniculinos (Paramecium) y los himenostómidos (Tetrahymena) forman un sólido grupo monofiléctico (clase Oligohymenophorea). Por último, la sólida monofilia de los oligohimenóforos, la traducción de los codones UAA por glutamano en peritricos, y por glutamina en Paramecium y Tetrahymena, y las relaciones bioquímicas y evolutivas de ambos aminoácidos sugieren que las r easignaciones de codones UAA en oligohemenógoros presentan un origen común. Estos códigos genéticos podrían ser reliquias del mecanismo que incorpora la vía directa de aminoacilación de la glutaminil-ARNt sintetasa en ecuariotas.
  • CILIADOS DEL ESTUARIO DEL RÍO NERVIÓN: COMPOSICIÓN Y DINÁMICA ESTACIONAL .
    Autor: URRUCHURTU GUTIÉRREZ IÑAKI.
    Año: 2002.
    Universidad: PAIS VASCO.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Resumen: Entre marzo de 2000 y marzo de 2002, se realizó un estudio sobre la composición taxonómica, así como la distribución especial y la dinámica estacional de la comunidad de ciliados presentes en el estuario del río Nervión y en el tramo final de sus principales afluentes. Se identificaron un total de 193 taxones entre los que destacan las especies de pequeño tamaño pertenecientes a las órdenes Scuticociliatida, Oligotrichida y Choreotrichida, tales como Uronema nigricans, Cyclidium glaucoma, Strombidium sp y Strombilidium elegans. Las mayores abundancias, superiores a 5 x 10 5 células l-1, se observaron en verano y correspondieron a la zona media del estuario, rica en nutrientes y materia orgánica procedente de la estación Depuradora de Aguas Residuales de Galindo. Los ríos mostraron también una mayor abundancia en verano, al igual que la concentración de biomasa, con valores de hasta 3,4 mg C l-1. En cuanto a la distribución vertical la mayoría de los grupos de ciliados mostraron una clara preferencia por la superficie, donde su densidad fue máxima. Las concentraciones más elevadas coincidieron con la bajamar, debidas a varios grupos, como oligotricos y escutiociliados, procedentes de la zona media del estuario donde son más abundantes.
  • AISLAMIENTO, CLONACION Y ANALISIS DE ONCE NUEVAS GENES DEL PROTOZOO CILIADO OXYTRICHA NOVA: IMPLICACIONES EN EL PROCESO DE ENQUISTAMIENTO .
    Autor: CALLEJAS ALEJANO SERGIO.
    Año: 2001.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA, UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID.
    Resumen: El principal objetivo de esta Tesis Doctoral es el aislamiento y caracterizacion molecular de genes macronucleares del ciliado hipotrico Oxytricha nova que se encuentren presumiblemente implicados en el proceso de enquistamiento de este microorganismo. El enquistamiento es un proceso de diferenciacion celular que tiene lugar en protozoos ciliados cuando las condiciones ambientales son adversas. Este proceso conlleva una serie de cambios estructurales, morfologicos y nucleares que necesariamente implican un cambio en el patron de expresion de muchos delos genes de estos microorganismos. Para llevar a cabo este estudio se aislaron muestras de ARNm procedentes de diferentes fases del proceso de diferenciacion, asi como de celulas vegetativas y quistes de resistencia maduros. Posteriormente, se procedio a la sintesis del ADNc de las diferentes poblaciones de ARNm y se amplificaron mediante PCR utilizando cebadores de secuencia arbitraria (DDRT-PCR). Tras comparar los diferentes patrones de polimorfismos obtenidos, se aislaron aquellas bandas que aparecian exclusivamente en estadios prequisticos o en quistes de resistencia maduros pero que no aparecian en celulas vegetativas. Estas bandas fueron clonadas y secuenciadas. Utilizando este metodo se aislaron diferentes fragmentos genicos que fueron marcados e hibridados con ADN macronuclear para determinar el tamaño de la molecula de ADN macronuclear a la que pertenecia cada una de ellas. Algunas de estas moleculas (4 en total) pudieron ser secuenciadas totalmente aplicando las tecnicas de Mac-End-PCR o End-End-PCR. El resto se encuentran aun en proceso de secuenciacion. Algunas de las moleculas caracterizadas (total o parcialmente) contienen genes como la alfa-manosidasa lisosomal, proteinas HMG(High Mobility Group protein), ARNr 5S,proteina ribosomica S26, ATPasa de Cu2+, ATPasa Na+/K+, fosfatidilinositol-4-fosfato-5-quinasa o la S-adenosilmetionina sintetasa. En el trabajo se realiza una amplia discusion sobre las caracteristicas moleculares de cada uno de los fragmentos genicos o genes complejos aislads comparandolos con los de otros organismos, asi como un estudio de las posibles implicaciones que puede tener uno de los elementos codificados por estas moleculas durante el proceso de enquistamiento.
  • EL MICROZOOPLANCTON EN AREAS TEMPLADAS DEL ATLANTICO NORORIENTAL: ESTRUCTURA DE LA COMUNIDAD Y CONTROL DE LA PRODUCCIÓN PRIMARIA.
    Autor: QUEVEDO DE ANTA MARIO.
    Año: 2001.
    Universidad: OVIEDO.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA DE LA UNIVERSIDAD DE OVIEDO.
    Resumen: Esta tesis doctoral se centra en el estudio del microzooplancton en regiones de distinta productividad del oceano Atlantico, prestando atención especial atencion a la variabilidad en la composición, biomasa y estructura de tamaños, asi como la interacción con los productores primarios por medio de la herbivoria. Los ciliados oligotricos y dinoflagelados heterótrofos dominan la biomasa del microzooplancton presenta valores situados entre los mas bajos de los ecosistemas marinos y una variabilidad mucho mayor que la de las variables ambientales, aumentando significativamente en las estructuras de mesoscala. La estructura de tamaños de microzooplancton reproduce la variación de los productores primarios que dominan regiones de productividad contrastada el oceano. La contribución de los protozoos fagotrofos mayores de 20 um en la transferencia de energia de la comunidad es mayor en areas mas productivas. Esta estructura de tamaños es consecuencia de la distribucion de tamaños de sus principales componentes, ciliados oligotricos y dinoflagelados heterotrofos. Las diferencias entre ambos grupos son constantes entre diferentes regiones y estaciones. La pendiente del espectro de tamaños de los ciliados oligotricos, mucho menor que la de los dinoflagelados, implica una mayor contribución relativa de los ciliados grandes a los flujos de energia del sistema. En el Atlantico subtropical nororiental tiene lugar un fuerte acoplamiento entre los productores primarios y los protistas fagotrofos, consumiendo entorno al 80% de la producción primaria particulada, sin que se aprecien diferencias en la predación sobre los distintos grupos de fitoplacton. Este hecho ha de traducirse en un reciclado eficiente de la materia organica particulada entre los productores primarios y los protistas fagótrofos. En una situación costera productiva el impacto de herbivoria del mircrozooplacton es bajo, y consistente con la escasa palatabilidad de los productores primarios dominantes. El impacto ha de ser mayor en otros momentos del ciclo estacional, cuando la comunidad de fitoplancton está dominada por celulas de menor tamaño.
  • CRYPTOSPORIDIOSIS ANIMAL. PREVALENCIA, FACTORES DE RIESGO Y TRATAMIENTO CON BETA-CICLODEXTRINA .
    Autor: CASTRO HERMIDA JOSÉ ANTONIO.
    Año: 2001.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: FARMACIA .
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
    Resumen: 1,- Se realizó un estudio epidemiológico con el fin de conocer con mayor precisión la prevalencia de la cryptosporidiosis neonatal bovina en Galicia y de establecer los factores que influyen en la difusión de la infección. Para llevar a cabo este trabajo, durante el año 2000 se acudió con una periodicidad de 21 días a 22 explotaciones ganaderas de la provincia de A Courña (12 de aptitud lechera y 10 de aptitud cárnica), de manera que se realizaron 16 muestreos/granja. Inicialmente, se realizó una encuesta sobre las características generales de cada explotación y las condiciones de estabulación y saneamiento de los terneros lactantes. Durante este período, nacieron 844 terneros de los cuales 404 eliminaban ooquistes de C.parvum, lo que representa una prevalencia de la cryptosporidiosis neonatal bovina del 47,9%. El análisis estadístico de los datos demostró que la prevalencia es superior en explotaciones con un número de animales adultos reducido (50-100 cabezas) y que el tipo de suelo sobre el que se asientan los terneros, así como el método y la frecuencia de la limpieza, son factores de riesgo para el padecimiento de la infección. De igual forma, se demostró la existencia de una asociación significativa entre la intensidad de parasitación por C.parvum y la consistencia líquida de las heces. Por otra parte, en una granja del Centro de Investigaciones Agrarias de Mabegondo, se realizó un estudio de seguimiento de la cryptosporidiosis en una cohorte de 32 terneros, desde el momento de su nacimiento hasta los 30 días de edad, con el fin de comprobar la presencia de ooquistes de C.parvum en sus heces durante el período de alto riesgo, todod adquieren la infección. Paralelamente, se analizaron las muestras fecales de 32 vacas, mediante un estudio realizado durante el período de periparto (+- 7 días), ene lq ue se observó que seis animales (18,7%) era portadores asintomáticos. Ante los resultados obtenidos, podemos afirmar que la cryptosporidiosis neonatal bovina es endémica en Galicia y que estos animales constituyen la principal fuente de contaminación ambiental. 2,- Se investigó la actividad anticruptosporidial del furoato de diloxanida y un derivado furánico sintético (G-1) tanto in vitro (mediante técnicas de desenquistamiento y de inclusión/exclusión de colorantes vitales fluorogénicos), como in vivo (en un modelo murino lactante). Además, se aplicaron nuevas formulaciones farmacéuticas con complejos de inclusión elaborados con beta-ciclodextrina que permiten mejorar la solubilidad y estabilidad de los principios activos y, por tanto, su biodisponibilidad y eficacia. Durante el desarrollo de estos ensayos, inesperadamente se descubrió la actividad anticryptosporidial del excipiente beta-ciclodextrina. 3,- Se evaluaron las eficacias profiláctica y terapéutica de la beta-ciclodextrina frente a la cryptosporidiosis en rumiantes domésticos natural y experimentalmente infectados por C.parvum. Los resultados demsotraron que la beta-ciclodextrina administrada terapéuticamente favorece la remisión de los síntomas y reduce la intensidad de parasitación. Además, administrada en régimen profiláctico puede disminuir la prevalencia, reducir la intensidad y duración del período de patencia y acortar significativamente el curso clínico de la enfermedad. Los animales incrementaron su peso, no presentaron signos evidentes de toxicidad y, en ningún caso, se detectó, durante el período de estudio, la existencia de reinfecciones.
  • DETERMINACIÓN DE LA CAPACIDAD INMUNOESTIMULADORA Y PROTECTIVA DE DETERMINADOS ANTÍGENOS DE L.INFANTUM FRENTE A LA INFECCIÓN EXPERIMENTAL EN PERRO .
    Autor: MOLANO BERMEJO M. ISABEL .
    Año: 2001.
    Universidad: EXTREMADURA.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: El objetivo del trabajo fue analizar la capacidad de la proteína multicomponente quimera de ser utilizada como vacuna contra la leishmaniosis canina, debido a sus propiedades antigénicas. La experiencia tuvo una duración de 504 días, de los cuales 105 días correspondieron al periodo de inmunización y 399 días al periodo de infección y desarrollo de la enfermedad. Concluyendo el estudio experimental con la necropsia reglada de los 10 animales utilizados para el estudio, los cuales fueron distribuidos en tres grupos, el grupo testigo o control formado por cuatro perros y el grupo de seis perros inmunizados, el cual fue dividido en dos grupos en función de la vacuna inoculada. El grupo A, formado por tres perros inmunizados con la proteína quimera en adyuvantes BCG y el grupo B, formado por tres perros inmunizados con la proteína quimera y la proteína de choque térmico Hsp 70. Se realizaron tres inmunizaciones y la vía de inmunización fue intraperitoneal. Para controlar la infección y evolución de la enfermedad con los animales de estudio y evaluar así la protectividad de la proteína quimera se realizo un amplio seguimiento de tipo biopatológico, parasitológico, inmunológico e histopatológico. En base a los resultados obtenidos durante los 504 que duró el estudio se pudo concluir que, la respuesta inmune generada por la proteína quimera de Leishmania infantum en adyuvante BCG, controlo la multiplicación del parásito, el fenómeno de hipersensibilidad tipo III y la expresión clínico-patológica de la leishmaniosis canina.
  • PUESTA A PUNTO DE METODOLOGÍAS PARA LA DETECCIÓN DE LOS PROTOZOOS GIARDIA Y CRYPTOSPORIDIUM EN AGUAS .
    Autor: DELLUNDE FULLADOSA JORDI.
    Año: 2001.
    Universidad: BARCELONA.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA .
    Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
    Resumen: GIARDIA Y CRYPTOSPORIDIUM, se han identificado como agentes etiológicos de responsables de diferentes brotes epidémicos de origen hídrico. El desarrollo de técnicas alternativas a la microscopia de epifluorescencia, habitualmente utilizada para su detección y enumeración (técnicas citométricas) nos ha permitido adaptar y poner a punto nuevas técnicas para realizar la concentración, detección y determinación de la vitalidad de dichos protozoos en muestras de aguas naturales así como, mediante el uso de las técnicas puestas a punto junto con el método de detección por PCR poder tener una primera idea de la contaminación de nuestras aguas naturales y de la especiación de estos protozoos parásitos.
  • CARACTERIZACION MOLECULAR DE ACTINAS ALTAMENTE DIVERGENTES DE CILIADOS HIPOTRICOS.
    Autor: PEREZ ROMERO PILAR.
    Año: 2000.
    Universidad: SEVILLA.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.
    Resumen: Los protozoos ciliados constituyen un phylum de eucariotas unicelulares altamente diferenciados. A pesar de la gran diversidad genética, los ciliados comparten caracteres celulares fundamentales que los distinguen claramente de los demás protistas. Los ciliados hipotricos es el grupo escogido como modelo de estudio de la actina ya que los datos bibliograficos indican que las pocas actinas de ciliados estudiados hasta la fecha muestran propiedades bioquímicas peculiares y baja semejanza con las actinas convencionales. Las actinas de los ciliados hipotricos analizados muestran baja semejanza con las actinas convencionales. Las distintas actinas presentes en una especie tienen grandes diferencias en la secuencia de aminoacidos. Las regiones más divergentes de las actinas de ciliados hipotricos se localizan en los subdominios 2 y 4 y en la región 3b del subdominio 3. Todas estas regiones se sitúan en la zona periferica de la molécula y están constituidas mayoritariamente por aminoácidos hidrofílicos. En consonancia con esta conclusión, se ha detectado una diferencia notable en la distribución de cargas superficiales entre la actina de H. Cavicola y la a-actina de conejo. Los motivos de interacción actina-actinak y los de union a ADNasa I, localizados en la superficie de la molécula, estan profundamente alterados en las actinas de hipotricos, lo que podría afectar a las propiedades de polimerización de la molécula y a la capacidad de unir ADNasa I. Las regiones internas hidrofóbicas son las mejor conservadas en la actina de hipotricos. Los sitios de unión a nucleótido y a calcio, que se localizan en el núcleo hidrofóbico de la molécula, son los motivos de interacción con ligandos más semejantes a las actinas convencionales. La comparación entre las estructuras proedio de la a-actina de conejo y la actina de H. Cavicola indican que las mayores diferencias entre ambas proteinas se localizan en los subdominios 2 y 4, especialmente en el primero. Durante la dinámica molecular el subdominio 2 de la actina de H. Cavicola se desplaza hacia el subdominio 4. Esta aproximacion podría crear un impedimento alostérico para la interacción con la ADNasal.
  • APLICACIÓN DE TECNICAS MOLECUARES EN EL DIAGNOSTICO Y LA EPIDEMIOLOGÍA DE LAS INFECCIONES POR MICROSPORIDIOS (PHYLUM MICROSPORIDIA) EN LA PROVINCIA DE PONTEVEDRA .
    Autor: LOREZ VAZQUEZ BEATRIZ.
    Año: 1999.
    Universidad: VIGO.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Resumen: En este trabajo se han analizado de forma sistemática, 1047 muestras bilógicas (heces, orinas, muestras respiratorias y biópsias) de un total de 337 pacientes, procedentes de dos Hospitales de la Provincia de Pontevedra. Los pacientes eran inmunodeprimidos, inmunocompetentes, sintomátiacos y asintomáticos. Se estudiaron también, un total de 75 animales domésticos de áreas rurales de las Provincias de Pontevedra y Orense. Se escogieron aquellos animales más signficativos por su proximidad a la especie humana. En todas las muestras se analizó la presencia de microsporidios (Phylum Microsporidia). Las muestras que resultaron positivas por tinción, se sometieron al proceso de extracción purificación de ADN, para confirmar e identificar los microsporidios a nivel de especie. Se utilizó la técncia de PCR empleando cebadores específicos frente a las principales especies de microsporidios patógenos humanos. ENTEROCYTOZOON BIENEUSI, fue la causa más frecuente de diarrea en pacientes VIH+, siendo su prevalencia la más elevada de todos los estudios realizados hasta la fecha en España. Esta misma especie de microsporidio, tiene una mayor presencia y capacidad de colonización en el aparato respiratorio humano de lo esperado y la inhalación es probablemente la principal ruta de adquisión de la microsporidiosis pulmonar. La presencia de microsporidiosis intestinales en población pediátrica y geriátrica podría indicar la común exposición a estos parásitos. La identificación de E.BIENEUSI, un microsporidio considerado exclusivamente humano, en animales domésticos, sugiere que probablemente esta infecciónse trate de una Zoonosis. El estudio epidemiológico realizado muestra que la inmunodepresión, el medio rural y los viajes a paises tropicales, son factores de riesgo para la adquisición de infecciones por microsporidios. Estos factores deberían tenerse en cuenta en el diagnóstico clínico y de laboratorio de estos parásitos.
  • CRYPTOSPORIDIUM EN ORGANISMOS ACUATICOS Y FACTORES AMBIENTALES QUE INFLUYEN EN LA VIABILIDAD OOQUISTICA.
    Autor: FREIRE SANTOS FRANCISCO.
    Año: 1999.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Resumen: Se valoró la influencia de la salinidad, la temperatura y el tiempo, sobre la viabilidad, evaluada in vivo (bioensayo en ratón) e in vitro (técnicas de desenquistamiento y de inclusión/exclusión de colorantes vitales fluorogénicos), de los ooquistes de Cryptosporidium parvum en suspensiones acuosas, empleando un diseño experimental 2x3 de primer orden. La interpretación estadística de los resultados obtenidos demostró que, en el intervalo de valores estudiado (establecido teniendo en cuenta los valores habituales en el medio hídrico), la salinidad, el tiempo y la interacción salinidad-tiempo, son los factores más influyentes sobre la viabilidad e infectividad ooquísticas. Teniendo en cuenta la baja dosis mínima infectante y la susceptibilidad de los hospedadores inmunocomprometidos, el hecho de que al menos un 20% de los ooquistes permanezcan viables y potencialmente infectantes, incluso en las condiciones más desfavorables de nuestro estudio, evidencia el alto riesgo que para la sanidad humana y animal representa la presencia de ooquistes de C. parvum en aguas superficiales. La detección de formas compatibles con ooquistes (tamaño y características de tinción similares) en el contenido intestinal de trucha común (Salmo trutta) sugiere que la infección natural puede presentarse en estos hospedadores, sin descartar la posibilidad de que tan solo actúen como vehículos de transporte y diseminación en el ambiente. Paralelamente, se intentó implantar la infección con ooquistes de C. parvum de origen bovino e infectantes para ratones lactantes en ejemplares de trucha arco iris (Oncorhynchus mykiss) de un año de edad inoculadas por vía oral. La observación microscópica de cortes histológicos realizados a nivel del estómago y ciegos pilóricos demostraron en el citoplasma de las células epiteliales, la presencia de unas estructuras bien delimitadas por un halo transparente, de 5-7 um de tamaño, en cuyo interior se apreción un número variable de corpúsculos (1-4) con características de tinción similares a las presentadas por el material nuclear de las células propias del tejido. La reacción positiva que exhibieron estas estructuras al utilizar técnicas inmunohistoquímicas, sugiere la presencia de material antigénico de C. parvum en estas células y plantea la posibilidad de que las especies de Cryptosporidium que infectan a mamíferos sólo puedan desarrollarse intracelularmente en peces o bien que los ooquistes ingeridos permanezcan retenidos en la mucosa intestinal de estos hospedadores. El hallazgo de ooquistes de Cryptosporidium sp, en más de la mitad de las muestras de moluscos bivalvos analizadas, pone de manifiesto la importancia de estos organismos acuáticos en la epidemiología de la cryptosporidiosis al actuar como potenciales transmisores de la infección. Se detectó una buena correlación entre los niveles de coliformes fecales y la presencia de ooquistes de Cryptosporidium sp. Un hallazgo importante fue la comprobación de que el proceso de depuración empleado para la comercialización de estos moluscos vivos resultó ineficaz para eliminar los ooquistes del parásito. El análisis de los tejidos branquial y gastrointestinal de ejemplares adultos de Ruditapes phillippinarum expuestos durante 48 horas a ooquistes de C. parvum de origen bovino, reveló la capacitación de estos ooquistes, su retención, mayoritariamente, en el tejido filtrador. La aplicación de técnicas in vitro e in vivo, demostraron la viabilidad e infectividad de los ooquistes retenidos, poniendo de manifiesto el potencial riesgo que para la salud pública supone el consumo de estos moluscos bivalvos crudos.
  • CONTROL, POR PARTE DE LOS PROTOZOOS, DE LAS COMUNIDADES BACTERIANAS EN DIFERENTES ECOSISTEMAS MARINOS .
    Autor: VAZQUEZ DOMINGUEZ EVARISTO.
    Año: 1999.
    Universidad: BARCELONA.
    Centro de lectura: BIOLOGIA .
    Resumen: A lo largo de la memoria de tesis se establecen comparaciones entre distintas técnicas de medida de ingestión bacteriana. Adicionalmente, en esta memoria se describe una nueva tecnica para cuantificar predación bacteriana de protozoos mediante citometria de flujo. Con posterioridad, en los diferentes capitulos, se estudian y comparan distintos ecosistemas, analizando la comunidad de microorganismos que contienen y las ingestiones bacteriadas observadas. A partir de los resultados obtenidos se reconoce, por un lado, que la comunidad de nanoflagelados es la principal responsable de la predación sobre el bacterioplanton y por otro lado, que la presión de predación sobre este es más elevadaen sistemas oligotróficos que en sistemas eutróficos.
  • DINOFLAGELADOS DE CANARIAS: ESTUDIO TAXONOMICO Y ECOLOGICO.
    Autor: OJEDA RODRIGUEZ ALICIA.
    Año: 1998.
    Universidad: LAS PALMAS DE GRAN CANARIA.
    Centro de lectura: CIENCIAS DEL MAR.
    Resumen: Se describen 191 especies y 16 variedades de dinoflagelados planctónicos mayores de 5 um, recolectados durante 10 años de estudio, mediante el análisis de muestras obtenidas con botellas oceanográficas tipo Niskin y red de plancton de 25 um, repartidas a lo largo de la plataforma y talud de cada una de las islas del archipiélago Canario, desde la superficie hasta una profundidad máxima de 150m. La ficha descriptiva de cada una de las especies se complementan con las referencias bibliográficas, datos biométricos, hábitat, distribución geográfica, localización en cada una de las Islas Canarias y de una ilustración original realizada a escala. En algunos casos, se acompaña de fotografías al microscopio óptico invertido. La confección de una clave sistemática a nivel genérico y a veces específico, facilita la determinación de las especies descritas. Del total de especies, noventa son nuevas citas para el archipiélago Canario y para 76 se amplía su distribución en la región. El 52.2% han sido consideradas como autótrofas, mientras que el 47,7% son organismos heterótrofos. De las 30 especies observadas que pueden ser causantes de mareas rojas, seis se encuentran entre las 25 especies más frecuentes y 13 han dado resultados positivos en los bioensayos de toxinas. El número de células y especies disminuye a medida que aumenta la profundidad, observándose los valores promedios más altos a nivel superficial o subsuperficial. La estratificación de la columna de agua es un factor importante en la composición específica y concentración de organismos. Parece existir una clara relación entre las zonas de abundancia mínima de dinoflagelados coincidentes con las regiones donde se han descrito abundancias máximas de zooplancton.
  • CONTRIBUCION AL ESTUDIO TAXONOMICO, ECOLOGICO Y COROLOGICO DE LA CLASE MYXOMYCETES EN ESPAÑA.
    Autor: CASTILLO DE LA TORRE AURELIO.
    Año: 1998.
    Universidad: ALCALA.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: UNIVERSIDAD DE ALCALA.
    Resumen: Los Myxomycetes es un grupo de organismos que, aunque tradicionalmente han sido estudiados por los micólogos, hoy en dia se incluyen en el Reino Protozoa. La investigación taxonómica en España comienza realmente a partir de la publicación del primer catalogo(de la Torre y Calonge, 1975), posteriormente se han publicado otros(Illana et al.,1990; lado, 1991 y 1993). En esta Tesis se han estudiado 1298 muestras y recolectadas en 150 localidades de 22 provincias españolas. Son descritas y comentadas 150 especies y 15 variedades, de todas figura un mapa de distribución a nivel nacional. Como resultado se destacan las siguientes: 1.-Se describen 3 nuevas especies para la ciencia y una variedad: Cormatricha meandrispora, Didymium rubeopus, D. Rubeopus var. Albocapillitium y Hemitrichia pseudoleiocarpa. 2.-Se aportan 8 nuevos taxones para Europa y 14 para España. 3.-Se amplia el catalogo de Myxomycetes en 20 provincias. 4.-Se proponen 2 combinaciones nuevas y se consideran 2 sinonimias. 5.-Es propuesta una nueva familia Protophysaraceae.
  • ESTUDI DE MICROSPORIDIOSIS EN PEIXOS D'INTERES COMERCIAL.
    Autor: AMIGO BONET JOSEP M..
    Año: 1995.
    Universidad: BARCELONA.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA ANIMAL. (ZOOLOGIA) PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA ANIMAL I ZOOLOGIA..
  • UTILIZACION PRACTICA DE LOS PROTOZOOS EN LA VALORACION DE LA CONTAMINACION ACUATICA.
    Autor: NOVILLO VILLAJOS APOLONIA.
    Año: 1995.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: ECOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: ECOLOGIA Y MEDIO AMBIENTE.
    Resumen: SE HA DESARROLLADO UNA METODOLOGIA PARA EL USO DE MICROCOSMOS CON COMUNIDADES NATURALES DE PROTOZOOS EN ESTUDIOS SOBRE LA TOXICIDAD DEL CADMIO Y DEL PLOM OEN EL MEDIO ACUATICO. LOS PARAMETROS DE RESPUESTA MAS SENSIBLES SON LA RIQUEZA DE ESPECIES Y LA COMPOSICION TAXONOMICA. LOS EXPERIMENTOS CON CADMIO MUESTRAN QUE LA TOXICIDAD DEL METAL DEPENDE DE LA CONCENTRACION EN LAS CELULAS Y EN EL AMBIENTE, ESTANDO RELACIONADA ESTA CON EL PH. EL EFECTO NEGATIVO DEL CADMIO EN LAS COMUNIDADES DE PROTOZOOS SE TRADUCE EN UNA SUSTITUCION DE LAS ESPECIES SENSIBLES POR OTRAS RESISTENTES, EN UNA REDUCCION DELA ABUNDANCIA Y LA BIOMASA Y, ADEMAS, EN UN CAMBIO EN LA DIVERSIDAD DE ESPECIES. POR EL CONTRARIO, EL TOXICO NO CAUSA LA ELIMINACION DE NINGUN GRUPO TROFICO EN CONCRETO. LAS COMUNIDADES DE PROTOZOOS MUESTRAN MECANISMOS DE TOLERANCIA. LOS EXPERIMENTOS REALIZADOS CON EL PLOMO INDICAN QUE ESTE ION ES TOXICO, CAUSANDO UNA DISMINUCION DEL NUMERO DE ESPECIES, DE LA ABUNDANCIA Y DE LA BIOMASA DELAS COMUNIDADES DE PROTOZOOS. TAMBIEN SE OBSERVA UNA REESTRUCTURACION DE LAS COMUNIDADES DE PROTOZOOS. SE CONCLUYE QUE LA METODOLOGIA DESARROLLADA ES EFICIENTE, ESTADISTICAMENTE INTERPRETABLE Y PUEDE APORTAR UNA IMPORTANTE INFORMACION PARA LA VALORACION DE LA CONTAMINACION POR CADMIO Y POR PLOMO EN MEDIOS ACUATICOS.
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