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GENETICA ANIMAL



91 tesis en 5 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5
  • Estudio de los genes Fgf15 y Fgf19 en el Desarrollo del Tubo Neural de vertebrados .
    Autor: Gimeno Arias Lourdes.
    Año: 2004.
    Universidad: MURCIA.
    Centro de lectura: Facultad de Medicina.
    Centro de realización: Facultad de Medicina (UM)-Instituto de Neurociencias de Alicante (CSIC-UMH).
    Resumen: El Sistema Nervioso de vertebrados se desarrolla a partir de una hoja epitelial aparentemente uniforme en el embrión temprano, y eventualmente produce varios cientos de fenotipos celulares cada uno de los cuales con características morfológicas, trayectorias axonales, contenido de neurotransmisores y conexiones sinápticas particulares. Cada tipo neuronal aparece en un tiempo y lugar preciso en el Sistema Nervioso en formación. El Sistema Nervioso Central (SNC) se especifica tempranamente, simultáneamente al proceso de Gastrulación, mediante la actuación de procesos de carácter inductivo. La Inducción Neural, parte de la Inducción Primaria, actúa en dos fases, la Inducción Planar (mediada por moléculas procedentes del Organizador Primario Nudo de Hense) y la Inducción Vertical (mediada por los Organizadores Primarios Notocorda y Placa Precordal) para especificar en la hoja ectodérmica, el prospectivo territorio neural, la placa neural. Tras la especificación del territorio neural y simultáneamente a la formación del esbozo cerebral los mecanismos de regionalización operan primero en la placa neural y después en el tubo neural, acompañando en éste último por procesos de segmentación. Estos procesos van a dividir al prospectivo territorio cerebral en subdivisiones longitudinales y trasversales originando una serie de dominios histogenéticos. Podemos distinguir en el SNC desde muy temprano en el desarrollo cuatro grandes subdivisiones o segmentos neurales, a lo largo de su eje rostro-caudal: el cerebro anterior o también llamado Prosencéfalo primario, el cerebro medio o Mesencéfalo, el cerebro posterior, o Rombencéfalo y la Médula Espinal, cada uno de los cuales con características propiedades morfológicas, histológicas y génicas. Estas regiones o segmentos neurales continúan regionalizándose y dividiéndose en sucesivas etapas del desarrollo. Los patrones de regionalización, tanto a lo largo de sus ejes antero-posterior como dorso-ventral del tubo neural, están regulados por la expresión de un grupo de genes "específicos de posición", es decir, genes que confieren una información posicional al territorio que se encuentra bajo su regulación, región donde se expresan y/o influyen. Dentro de este grupo de genes cabe destacar los genes selectores homeóticos, genes que codifican factores de transcripción que proporcionan una información específica posicional a lo largo del eje rostro-caudal del embrión de Drosophila melanoganster y que están conservados en vertebrados; son la familia de genes Hox en vertebrados y son los responsables de la segmentación rombencefálica y espinal, quizás la más evidente en el embrión en desarrollo, y del desarrollo de las estructuras axiales. Esta familia de genes no se expresa en territorios anteriores del esbozo cerebral pero se han encontrado otro repertorio de factores de transcripción, expresados a niveles más rostrales y conservados muchos de ellos en Drosophila, que controlan la regionalización en territorios específicos más rostrales; así podríamos hablar de familias génicas como Engrailed (En) en el mesencéfalo y rombencéfalo rostral, o las familias Otx y Emx en los dominios más rostrales del neuroepitelio y de las familias Pax, Dlx, Nkx2, entre otros, que presentan dominios de expresión en varios territorios rostrales del neuroepitelio. Además habría que mencionar otra serie de moléculas, factores secretables, que producidas en tejidos y áreas precisas, participan en los procesos de regionalización del cerebro. Moléculas de este tipo, son miembros de las familias FGF, HH, WNT o BMP, que controlan el desarrollo y regionalización de grandes áreas del cerebro, siendo también algunas de ellas moléculas responsables de la actividad de Organizadores Secundarios del cerebro. La señal transmitida por estos morfógenos es interpretada en la mayoría de los casos de una forma diferencial según el territorio donde actúen, poniendo de manifiesto la distinta competencia de respuesta hacia señales inductivas del territorio neural en función del dominio donde nos encontremos y de los diferentes programas de desarrollo que llevan a acabo los distintos territorios del neuroepitelio. La observación de patrones de expresión de genes en el territorio prosencefálico ha permitido desarrollar un modelo en el que se propone una segmentación del Prosencéfalo en segmentos neurales, neurómeros o prosómeros, análogo a lo que ocurría en el Rombencéfalo. Este modelo, el Modelo Prosomérico, atribuye un significado estructural a la expresión de genes en el Prosencéfalo y divide éste en segmentos trasversales y longitudinales en base a esa expresión génica. Estos procesos moleculares de regionalización y especificación del epitelio neural van a ir acompañados de fenómenos celulares de carácter proliferativo y de crecimiento diferencial de las distintas regiones neuroepiteliales así como del establecimiento de las conexiones celulares necesarias para dar lugar al cerebro adulto funcional. El trabajo presentado en esta Tesis comienza con la descripción del patrón de expresión de un gen recientemente identificado, un miembro de la familia FGF, el gen Fgf15, a lo largo del desarrollo del SNC del ratón. El patrón de expresión de Fgf15 en fases tempranas sugiere fuertemente una relación con los Organizadores Secundarios del neuroepitelio y las moléculas responsables de su actividad, Fgf8 en el Organizador Anterior (ANR) y Organizador Istmico (IsO) y Shh en el Organizador Diencefálico (ZLI), dando paso a la segunda parte del trabajo, que consistió en el estudio del posible papel del gen Fgf15 en el desarrollo del SNC del ratón en general y su relación con la actividad de los Organizadores Secundarios del neuroepitelio (ANR, IsO y ZLI) en particular. Para ello se llevaron a cabo diversas estrategias de ganancia de función (como la utilización de proteína recombinante para Fgf8 y la micro-electroporación de diversos vectores de expresión, mFgf15 y mShh) y pérdida de función (como la utilización de la micro-electroporación del vector de interferencia para el gen mFgf15 o el análisis de la expresión de éste gen, Fgf15, en ratones nulos, knock-out, para el gen Wnt1). Como tercera parte se clonó el ortólogo del gen Fgf15 en pollo, el gen Fgf19, y se describió su patrón de expresión a lo largo del desarrollo del SNC del pollo. Estos genes ortólogos, presentan diferencias importantes de secuencia, su homología es, por lo tanto, baja, mostrando también diferencias en lo que se refiere a sus patrones de expresión en el neuroepitelio. Sin embargo, se les ha relacionado en algunas funciones en diversos trabajos. Nosotros también hemos aportado datos que señalan la posible relación de Fgf19 con los Organizadores Secundarios del cerebro, al igual que sucede con Fgf15.
  • MAIZ BT. SEGUIMIENTO DE LA RESISTENCIA DE SESAMIA NONAGRIOIDES (LEPIDOPTERA.NOCTUIDAE) Y OSTRINIA NUBILALIS (LEPIDOPTERA.CRAMBIDAE) Y EFECTOS EN ARTROPODOS DEPREDADORES.
    Autor: POZA GOMEZ MARTA DE LA.
    Año: 2004.
    Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
    Centro de lectura: E.T.S. INGENIEROS AGRONOMOS.
    Centro de realización: CENTRO INVESTIGACIONES BIOLOGICAS.
    Resumen: Desde 1999 hasta 2002 se realizó un seguimiento de la resistencia de S. nonagrioides y O. nubilalis al maíz Bt var. Compa CB (derivada del evento 176, que expresa la toxina Cry1Ab) en zonas representativas del cultivo del maíz en España. Para dichas poblaciones se calculó la concentración de Cry1Ab que mata al 50% de la población (CL50) y se comparó en el tiempo para determinar cambios en la susceptibilidad. No se observó una tendencia gradual hacia mayores niveles de tolerancia, lo que sugiere que los ligeros cambios en la susceptibilidad detectados son debidos a la variabilidad existente en poblaciones naturales de S. nonagrioides y O. nubilalis y no el resultado de la selección de resistencia. Asimismo, se realizaron dos selecciones consecutivas de resistencia en laboratorio para cada especie, sometiendo a poblaciones de S. nonagrioides y O. nubilalis a dosis crecientes de la toxina Cry1Ab durante 8 generaciones. El resultado de estas selecciones fue un aumento de tolerancia de 2 y 21 veces más que la población control en sendas selecciones de S. nonagrioides y de 6 y 10 veces en las selecciones de O. nubilalis. Esto sugiere que el potencial para desarrollar niveles bajos o moderados de tolerancia a la toxina Cry1Ab puede ser relativamente común entre las poblaciones españolas de taladros del maíz. Finalmente, ninguna de las larvas recogidas en campo o seleccionadas en laboratorio fue capaz de sobrevivir en maíz Bt.Por otro lado, se realizó un estudio de la genética poblacional de S. nonagrioides mediante la técnica de RAPD-PCR, ya que el conocimiento de aquélla es importante para aplicar estrategias de manejo de la resistencia adecuadas. Se analizaron dos poblaciones del valle del Ebro, dos de la zona centro de la Península y dos de Badajoz. Los índices de similitud y las distancias genéticas calculadas indican poca diferenciación entre las seis poblaciones. La tasa efectiva de migración (Nm), calculada como estima del flujo génico entre las poblaciones estudiadas, fue mayor que 2; valor que se considera suficiente para impedir la diferenciación genética entre poblaciones.Por último, se estudiaron los artrópodos depredadores de un campo comercial de maíz situado al sureste de la Comunidad de Madrid durante tres años (de 2000 a 2002) desde mediados de junio hasta finales de septiembre. Se compararon efectos en la abundancia de depredadores presentes en la planta mediante conteo visual y en el suelo mediante trampas de gravedad en parcelas de maíz Bt (var. Compa CB), maíz no Bt (var. Dracma) sin tratamiento insecticida y maíz no Bt pildorado con imidacloprid. Del mismo modo, se compararon los efectos de estos tres tratamientos en la riqueza y diversidad de especies de carábidos y arañas terrestres. El 94% de los depredadores encontrados en el muestreo visual se compuso de: arañas, dos especies del género Orius, Stethorus punctillum y Chrysoperla carnea; el 95% de los depredadores capturados en trampas de gravedad fueron arañas, carábidos y estafilínidos. Todos ellos son depredadores generalistas, excepto S. punctillum, que es depredador especialista de ácaros fitófagos. En cuanto a la abundancia de depredadores, sólo los estafilínidos vieron disminuida significativamente su abundancia en el tratamiento de maíz Bt, aunque estas diferencias se concentraron en una fecha concreta del muestreo en los años 2000 y 2002. Los índices de riqueza y diversidad de las comunidades de arañas y carábidos terrestres no variaron significativamente entre tratamientos.Desde 1999 hasta 2002 se realizó un seguimiento de la resistencia de S. nonagrioides y O. nubilalis al maíz Bt var. Compa CB (derivada del evento 176, que expresa la toxina Cry1Ab) en zonas representativas del cultivo del maíz en España. Para dichas poblaciones se calculó la concentración de Cry1Ab que mata al 50% de la población (CL50) y se comparó en el tiempo para determinar cambios en la susceptibilidad. No se observó una tendencia gradual hacia mayores niveles de tolerancia, lo que sugiere que los ligeros cambios en la susceptibilidad detectados son debidos a la variabilidad existente en poblaciones naturales de S. nonagrioides y O. nubilalis y no el resultado de la selección de resistencia. Asimismo, se realizaron dos selecciones consecutivas de resistencia en laboratorio para cada especie, sometiendo a poblaciones de S. nonagrioides y O. nubilalis a dosis crecientes de la toxina Cry1Ab durante 8 generaciones. El resultado de estas selecciones fue un aumento de tolerancia de 2 y 21 veces más que la población control en sendas selecciones de S. nonagrioides y de 6 y 10 veces en las selecciones de O. nubilalis. Esto sugiere que el potencial para desarrollar niveles bajos o moderados de tolerancia a la toxina Cry1Ab puede ser relativamente común entre las poblaciones españolas de taladros del maíz. Finalmente, ninguna de las larvas recogidas en campo o seleccionadas en laboratorio fue capaz de sobrevivir en maíz Bt.Por otro lado, se realizó un estudio de la genética poblacional de S. nonagrioides mediante la técnica de RAPD-PCR, ya que el conocimiento de aquélla es importante para aplicar estrategias de manejo de la resistencia adecuadas. Se analizaron dos poblaciones del valle del Ebro, dos de la zona centro de la Península y dos de Badajoz. Los índices de similitud y las distancias genéticas calculadas indican poca diferenciación entre las seis poblaciones. La tasa efectiva de migración (Nm), calculada como estima del flujo génico entre las poblaciones estudiadas, fue mayor que 2; valor que se considera suficiente para impedir la diferenciación genética entre poblaciones.Por último, se estudiaron los artrópodos depredadores de un campo comercial de maíz situado al sureste de la Comunidad de Madrid durante tres años (de 2000 a 2002) desde mediados de junio hasta finales de septiembre. Se compararon efectos en la abundancia de depredadores presentes en la planta mediante conteo visual y en el suelo mediante trampas de gravedad en parcelas de maíz Bt (var. Compa CB), maíz no Bt (var. Dracma) sin tratamiento insecticida y maíz no Bt pildorado con imidacloprid. Del mismo modo, se compararon los efectos de estos tres tratamientos en la riqueza y diversidad de especies de carábidos y arañas terrestres. El 94% de los depredadores encontrados en el muestreo visual se compuso de: arañas, dos especies del género Orius, Stethorus punctillum y Chrysoperla carnea; el 95% de los depredadores capturados en trampas de gravedad fueron arañas, carábidos y estafilínidos. Todos ellos son depredadores generalistas, excepto S. punctillum, que es depredador especialista de ácaros fitófagos. En cuanto a la abundancia de depredadores, sólo los estafilínidos vieron disminuida significativamente su abundancia en el tratamiento de maíz Bt, aunque estas diferencias se concentraron en una fecha concreta del muestreo en los años 2000 y 2002. Los índices de riqueza y diversidad de las comunidades de arañas y carábidos terrestres no variaron significativamente entre tratamientos.
  • DETECCION DE QTLS IMPLICADOS EN LA PRODUCCION LACTEA Y EN LA MORFOLOGIA MAMARIA MEDIANTE SECUENCIAS MICROSATELITE EN EL GANADO OVINO .
    Autor: FAWZY ABD EL AAL EL ZAREI MOHAMED.
    Año: 2003.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Centro de realización: UNIVERSIDAD DE LEON.
    Resumen: En el presente estudio se han planteado los siguientes objetivos: (i) elaboración de los mapas de ligamiento de los cromosomas 1 a 10, en la población de raza Churra y (ii) búsqueda de las zonas cromosómicas que explican parte de la variabilidad fenotípica, para los caracteres de producción de leche y morfología mamaria. Para lograr estos objetivos se ha utilizado un diseño experimetnal, el esquema general del trabajo incluye la elección de los animales que constituyen el diseño hija, la extracción de dna, la elcción de los marcadores microsatélites distribuidos en los autosomas, la puesta a punto de los diferentes grupos de maradores que amplifican de forma conjunta (multiplex) así como de ls diferentes multiplex que se cargaran el el mismo gel (multicarga). Los animales han sido genotipados para un total de 82 marcadores de tipo microsatélite que se encuentran distribuidos a lo largo de los cromosomas OAR1 a OAR10. La metodología empleada para identificación genotípica incluye PCR multiplex y separación electroforética en un secuenciador automático capaz de diferenciar 4 colores en cada línea de migración electroforética. A partir de los genoripos informativos se han elaborado los mapas de ligamiento formado únicamente por las meiosis producidas en los gametos masculinos para los cromosomas 1 a 10 de la población de raza Churra analizada. La detección de QTLs se ha realizado mediante el sistema de mapeo por intervalos empleando el método de regresión multimarcador como procedimiento estadístico. La estimación de los valores críticos se ha realizado mediante permutación de los fenotipos en los genotipos. Las variables fenotípicas empleadas han sido las yield deviations estimadas con un modelo animal (BLUP). Los 82 marcadores analizados han sido amplificados de forma conjunta en 30 reacciones multiplex y separados de forma conjunta en 10 reacciones multicarga aportando una herramienta importante en el análisis de ligamiento en la especie ovina. Los mapas de ligamiento elaborados para los cromosomas 1 a 10, confirman que la estructura genómica de estos cromosomas en la oveja Churra, no difiere de la encontrada por otros autores en otras razas ovinas y además, la densidad de los marcadores, ha permitido la obtención de un contenido de información aceptable en los estudios para detectar genes responsables de caracteres con interés económico en esta especie. Se han detectado cuatro QTLs con influencia sobre caracteres de producción de leche, en los cromosomas OAR2, OAR3, OAR4 y OAR8 y que afectan a los carcteres de leche ordeñada entre el día 30 y 120 y al porcentaje proteico de la leche. En el caso de los caracteres de morfología mamaria se han hallado cinco regiones genómicas que han mostrado evidencias de incluir sobre los fenotipos ángulo de los pezones, conformación global de la ubre, y tamaño de los pezones. Dichas regiones se encuentran localizadas en los cromosomas OAR4, OAR6, OAR7, OAR8 y OAR10.
  • DETECCION DE REGIONES GENOMICAS CON INFLUENCIA SOBRE CARACTERES DE PRODUCCION LACTEA Y MORFOLOGIA MAMARIA EN EL GANADO OVINO DE RAZA CHURRA .
    Autor: GUTIERREZ GIL BEATRIZ.
    Año: 2003.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Centro de realización: UNIVERSIDAD DE LEON.
    Resumen: El objetivo de este estudio es la búsqueda de regiones genómicas con influencia sobre distintos aspectos relacionados con la producción láctea en el ganado ovino de raza churra. Los caracteres considerados fueron los siguientes: producción de leche, porcentaje de proteína, porcentaje de grasa, recuento de células somáticas (SCS) y distintos parámetros relacionados con la morfología mamaria. Este trabajo se enmarca dentro de un proyecto de barrido genómico de los cromosomas autosómicos ovinos mediante el análisis de marcadores de tipo microsatélite. Como diseño experimental se utilizó el conocido como diseño hija, utilizando 1421 ovejas pertenecientes a 11 familias de mediohermanas del Núcleo de Selcción de ANCHE (Asociación Nacional de Criadores de Ganado Ovino Selecto de raza Churra) y distribuidas en 17 explotaciones. Para conseguir el máximo rendimiento del esfuerzo laboratorial se opto por la optimización de reacciones de PCR-multiplex en las que varios marcadores eran amplificados simultáneamente. A su vez, tres de esas reacciones se agruparon en combinacones multicarga, lo que permitió un análisis simultáneo de varios marcadores. las medidas cuantitativas utilizadas han sido las yield deviations estimadas con un modelo animal (BLUP). En la primera sección de resultados se detalla el protocolo de las combinaciones multicarga optimizadas por la doctoranda que presenta este trabajo, así como los problemas que se detectaron en las fases de optimización y análisis de las distintas reacciones de PCR-multiplex. Sedescriben los métodos y criterios que se siguieron para solucionar las distintas dificultades. En la segunda sección de los resultados se presentan los mapas de ligamiento construidos en la población de Churra estudiada para los cromosomas ovinos OAR11a OAR26, constituyendo éstos aproximadamente la mitad de la longitud del mapa global del proyecto conjunto de barrido genómico. Asimismo, se muestran los resultados obtenidos tras el análisis de QTLs en los cromosomas antes citados, para los caracteres en estudio. Por lo que se refiere al análisis de QTLs, el resultado de mayor interés fue el QTL detectado para el carácter porcentaje de grasa en la región distal del cromosoma OAR20, con un nivel de significación del 0,1% en el análisis across-families. Para ese mismo cromosoma, OAR20, el carácter SCS resultó significativo a un nivel 5% chromosomewise. La función estadística de dicho carácter se maximizó en la región en la que se encuentra el complejo mayor de histocompatibilidad, región responsable de parte de la respuesta inmune de un individuo frente a la infección. Otros cromosomas en los que se alcanzó un nivel de significación del 5% chromosomewise fueron el cromosoma OAR15 para el carácter porcentaje de proteína y el cromosoma OAR26 para el carácter morfológico inserción de la ubre. En otros casos, los análisis sugirieron posibles asociaciones con distintos caracteres aunque con un nivel de significación del 10% chromosomewise o muy próximo al mismo. Aunque, estos resultados no alcanzan un nivel de significación notable, sin embargo, teniendo en cuenta el limitado poder estadístico de nuestro diseó no deben ser descartados como indicadores de posibles zonas cromosómicas de interés. Así, para el carácter porcentaje de grasa se señalaron posibles regiones de interés en los cromosomas OAR14 (extremo distal) y OAR24 (región centromérica). Por su parte, el test estadístico realizado par el carácter de forma global de la ubre presentó valores de p
  • ASPECTOS VETERINARIOS DEL PROGRAMA DE REINTRODUCCIÓN DE LA NUTRIA EURASIÁTICA (LUTRA LUTRA): HEMATOLOGÍA, ANESTESIA Y CONTROL DE LA RESPUESTA DE ESTRÉS .
    Autor: FERNÁNDEZ MORÁN JESÚS .
    Año: 2003.
    Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.
    Resumen: Entre los años 1995 y 2000 se llevó a cabo en Cataluña el Plan de Reintroducción de la nutria (Lutra lutra) (PRNC), mediante el cual se liberaron en las cuencas de los ríos Muga y fluviá hasta un total de 42 ejemplares procedentes de Extremadura, Asturias y Portugal. Los animales fueron capturados mediante trampas cepo con bordes acolchados (softcatch) y trasladados al Zoo de Barcelona, en donde se realizaba el seguimiento veterinario durante las diferentes fases del proyecto. Aunque existía abundante información fisiológica y veterinaria de algunos mustélidos (especialmente de la nutria americana, Lontra canadensis), se encontró muy poca concerniente a la nutria euroasiática por lo que uno de los objetivos iniciales del proyecto consistió en la obtención de valores de referencia así como protocolos de manejo seguros y eficaces. En primer lugar y a partir de 33 animales, se establecieron los intervalos hematológicos y bioquímicos de referencia. Comparados con los valores citados previamente para esta especie, se encontraron un mayor número de leucocitos y neutrófilos y un menor valor para los eosinófilos y linfocitos. Así mismo, en nuestros animales las actividades de la AST (aspartato amino transferasa) y la kC (creatin kinasa) fueron más elevadas. Comparados con la nutria americana, nuestras nutrias mostraron un menor número de eritrocitos con un mayor volumen y hemoglobina corpuscular media. Con el fin de establecer un protocolo de anestesia seguro, eficaz y reversible durante el proyecto, se examinó la combinación de medetomidina con ketamina. Para tal fin se estudiaron 82 procedimientos anestésicos llevados a cabo en 38 ejemplares. La dosis media de ketamina fue de 5.1 +- 0.8 (3.4-6.6) mg/kg (media +- desviación estándar, rango) combinada con medetomidina a dosis de 51 +- 8 ug (34-66 ug/kg). Este protocolo se mostró eficaz y seguro por lo que puede ser recomendado para la captura y manejo de la nutria durante proyectos similares. Sin embargo, y a pesar de su reversibilidad mediante atipamezole, se debe prestar atención a la posible aparición de bradicardia y depresión cardiovascular. También se evaluaron los métodos de captura y manejo empleados el proyecto. Así, las lesiones producidas durante la captura se clasificaron en cuatro categorias según su severidad. Treinta y cuatro (79%) animales entraron en la categoría con lesiones menos importantes, tipo I, tres (7%) en la categoría II, cinco (12%) en la III y sólo una nutría (2%) sufrió lesiones más graves (categoría IV). Durante el periodo de cautividad 5 (11%) animales murrieron incluyendo a uno con lesiones producidas previas a la captura. Se implantaron quirúrgicamente (vía intraperitoneal) radotransmisiores a 36 individuos con el fin de poder ser monitorizados tras su liberación. Al menos 3 hembras implantadas y estudiadas mediante radiotracking se reprodujeron en el periodo posterior a la suelta. Con el fin de reducir al máximo el estrés de los animales durante la traslocaciones, se han citado diversas técnicas como son la reducción o la extensión de periodo en que los animales permanecen en cautividad y el empleo de neurolépticos de larga duración (LAN). Durante el tiempo que nuestras nutrias estuvieron en cautividad, los principales parámetros hematológicos y bioquímicos relacionados con el estrés (RBC, Hb, leucocitos, neutrófilos, AST, ALT, CK, AP y LDH) variaron significativamente, lo que significia que el estrés disminuyó conforme se adaptaban a sus nuevas condiciones de vida en el zoológico. El empleo del enantato de perfenazina (Trilafon) a dosis 2.9-5.4 mg/kg, no influyó en ninguno de los parámetros estudiados aunque produjo un efecto de sedación moderada que perduró entre 5 y 7 días, periodo en el que fue posible detectar niveles séricos superiores a 3 ng/ml (cromatografía).
  • ANÁLISIS DE LA DIFERENCIACIÓN GENÉTICA MORFOLÓGICA Y ECOLÓGICA ASOCIADAS A LA ESPECIACIÓN EN EL GÉNERO PELODYTES (ANURA, PELODYTIDAE) .
    Autor: SÁNCHEZ HERRÁIZ M. JESÚS.
    Año: 2003.
    Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: MUSEO NACIONAL DE CIENCIAS NATURALES.
    Resumen: Se trata de un estudio multidisciplinar que aborda un caso de especiación en anfibios, analizándose comparativamente a nivel poblacional, la diferenciación de los linajes actuales desde perspectivas genéticas, morfológicas y ecológicas. Los análisis de la diferenciación genética se abordan desde dos metodologías diferentes: por un lado mediante la secuenciación de fragmentos de dos genes del ADN mitcocondrial y en segundo lugar mediante el análisis de electroforesis de proteínas a través de 18 sistemas enzimáticos pertenecientes a 28 loci. El estudio morfológico valora la diferenciación fenotípica de forma cuantitativa, con morfología externa y del esqueleto articulado, así como a través de un análisis osteológico, fenético y cladístico que tiene en cuenta la historia paleontológica del grupo. Se incluye en este estudio una aproximación experimental sobre la plasticidad fenotípica existente en determinados caracteres morfológicos durante las fases larvarias y de metamorfosis cuando se ven sometidos a distintos factores ambientales. Los análisis de la diferenciación ecológica se realizan desde perspectivas diversas. Las investigaciones autoecológicas integran aspectos de la biología poblacional, en parte experimentales en condiciones seminaturales y en parte mediante la aplicación de técnicas esqueletocronológicas. Asimismo se delimitan las variables bioacústicas diagnósticas entre especies y otros aspectos conductuales asociados a la reproducción. Para complementar el presente trabajo, se incluye un estudio de zoogeografía ecológica en el que se valoran los condicionantes ambientales, desde un punto de vista climático, litológico y geográfico, que influyen sobre la distribución real y potencial de ambas especies en la península ibérica. Posteriormente, se integra todal a información obtenida a través de las diferentes aproximaciones y metodologías aplicadas, en una discusión de los mecanismos de especiación presuntamente involucrados, proponiéndose diversas hipótesis así como rechazando otras. Se obtienen conclusiones acerca del grado de diferenciación alcanzada por las diferentes especies a nivel genotípico, fenotípico y de comportamiento, en las que se integran los mecanismos paleogeográficos y ecológicos que han podido dar lugar al proceso de diferenciación de las poblaciones ancestrales en diferentes linajes, y el mantenimiento de los mismos como grupos diferenciados en su interacción con otras especies (mecanismos de aislamiento pre y post-zigóticos). Finalmente, se evalúa el grado de esclarecimiento aportado por las diferentes aproximaciones metodológicas aplicadas, revalidánose la congruencia entre ellas y la idoneidad de la utilización de estudios de carácter multidisciplinar en estudios futuros de esta índole.
  • DIFERENCIACIÓN GENÉTICA DEL MEJILLÓN (MYTILUS SPP.) DE LA COSTA PACÍFICA DE SUDAMÉRICA .
    Autor: CARCAMO HERNÁNDEZ CLAUDIA BEATRIZ.
    Año: 2003.
    Universidad: VIGO.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS - VIGO.
    Resumen: La taxonomía del grupo congenérico de Mytilus se realizó a partir de caracteres morfológicos de la concha, pero dada la plasticidad fenotípica y su capacidad para formar híbrdios entre formas distintas en zonas donde sus rangos se superponen, la identificación era confusa. Las técnicas moleculares, como la electroforesis de alozimas y los marcadores de DNA nuclear y mitocondrial, proporcionaron marcadroes diagnósticos entre diferentes taxones, permitiendo una clara identificación de los mismos, además de una mayor comprensión de su distribución, de la estructura genética poblacional y de sus relaciones evolutivas. La identidad de los mejillones del hemisferio Sur sigue siendo controvertida, sobre todo en las costas del Pacífico Sudamericano. Los objetivos del presente estudio fueron identificar la forma de Mytilus presente en las costas del Pacífico Sudamericano, determinar la estructura genética interpoblaciónal e indagar en las relaciones evolutivas con otros taxones de Mytilus.Se estudiaron 30 loci alozímicos, 2 marcadores de DNA nuclear y secuencias del gen Glu 5' en 19 poblaciones recolectadas a lo largo de todo su rango de distribución y en poblaciones control de M.edulis de Holanda, M.galloprincialis de las Penínsulas Ibérica, Italia, Sudáfrica, Australia y Japón y M.trossulus de Canadá. Las frecuencias de los locio alozímicos entre M.edulis y M.galloprovincialis, el análisis de los genotipos individuales, de las frecuencias alélicas y de ordenación de distintas distancias genéticas, así como el estudio de 2 marcadores de DNA y las secuencias de DNA de Glu 5', mostraron que las poblaciones sudamericanas estaban genéticamente más próximas a M.galloprovincialis que a M.edulis de Europa, pero manteniendo unas características propias. Teniendo esto en cuenta y considerando la ausencia de un marcador diagnóstico para dichas poblaciones sudamericanas, se propuso como nomenclatura más adecuada la de Mytilus galloprovincialis chilensis. Por otro lado, la población más oriental del Estrecho de Magallanes mostrón una importante similitud genética con las poblaciones Atlánticas pro lo que puede ser considerada como Mytilus edulis platensis. Las poblaciones sudamericanas del Pacífico mostraron la presencia de 2 acervos genéticos, posiblemente causada por una limitación en el flujo genético debida a la división del a corriente de Deriva del Oeste al chocar contra el continente a la altura del límite entre dichos grupos, formando la corriente de Humbolt y la de Cabo de Hornos. Además, en el Estrecho de Magallanes las poblaciones presentaron un incremento de los alelos típicos de M.edulis en una frecuencia creciente desde el Pacífico al Atlántico, que puede contribuir a esa diferenciación norte-sur, siendo indicativos de la presencia de una zona híbrida, todavía no bien caracterizada. Se planteó, la hipótesis de una migración transoceánica de Mytilus desde Australasia hacia el litoral Pacifico de Sudamérica para explicar la presencia de Mytilus en dichas costas.
  • EL ESTUDIO DE LA BASE GENÉTICA DEL COLOR DE LA CAPA Y APLICACIONES PRÁCTICAS EN PORCINO .
    Autor: FERNÁNDEZ ÁVILA ANA ISABEL.
    Año: 2002.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA.
    Centro de realización: INSTITUTO NACIONAL DE INVESTIGACIONES AGRARIAS.
    Resumen: El objetivo planteado en este trabajo ha sido el análisis en la especie porcina de tres de los genes que codifican proteínas implicadas en el proceso de regulación de la melanogénesis en mamíferos, estos son MC1R, Agouti y Pink. El trabajo se ha centrado principalmente en la raza Ibérica, raza que presenta una gran diversidad de tonalidades representadas por sus diversas variedades (desde negro a rubio), además se han empleado muestras representativas de diversos orígenes de cerdos domésticos y jabalí. El gen MC1R ya había sido estudiado en trabajos anteriores, detectándose la existencia de seis alelos. En este trabajo se ha analizado, a través de secuenciación del producto de amplificación, la totalidad del único exón (950 pb) del gen y parte de las regiones intrónicas adyacentes, en total se han secuenciado 1828 pb en 26 cerdos pertenecientes a las razas Duroc, Landrace, Meishan, Pampa, Mangalitza (colorado y golondrino), Vasco, Manchado de Jabugo, Ibérica (negra, colorada y entrepelada) y jabalí. El resultado de este análisis ha permitido detectar 18 polimorfismos, 9 en la región codificante y otros 9 en la región no codificante del gen. La combinación de estos polimorfismos constituyen 8 haplotipos distintos, no se detecta la presencia del haplotipo MC1R*5. Entre estos destaca la detección de tres nuevos haplotipos: MC1R*7 constituido por la inserción de dos citosinas en la posición 896 del gen detectado en animales colorados de la raza Ibérica, MC1R*8 constituido por la combinación del haplotipo MC1R*6 junto a una delección en la región no codificante (posición 1797), detectado en animales con capa colorada de la raza Mangalitza y MC1R*9 constituido por el alelo MC1R*1 junto a una transversión en la región no codificante (posición 432) y detectado en animales con color de capa golondrina de la raza Mangalitza. Respecto al análisis de la diversidad genética en las poblaciones de la raza Ibérica analizadas a través del genotipado a gran escala (metodologías de PCR-RFLP, PCR-SSCP y análisis del tamaño de los fragmentos amplificados), se ha detectado la presencia del haplotipo MC1R*3 fijado en la población de cerdos con capa negra, de acuerdo con la funcionalidad atribuida a este haplotipo. Por otro lado, se ha detectado la presencia de los haplotipos MC1R*6 y MC1R*7 a elevada frecuencia en las poblaciones con capa colorada (colorados y entrepelados) de acuerdo con la funcionalidad atribuida a estos haplotipos, sin embargo también se detecta la presencia del haplotipo MC1R*3 a baja frecuencia y en heterocigosis en estas poblaciones, lo que no es compatible con la hipótesis tradicionalmente aceptada de dominancia completa. Por otro lado, el genotipo de estas poblaciones permitió detectar la introgresión en dos poblaciones consideradas ibéricas de haplotipos detectados y fijados en otras razas porcinas, así en una población con color de capa negra se detectó la presencia del haplotipo MC1R*2, alelo procedente posiblemente de la raza de origen asiático Large Black. En la población Manchado de Jabugo, frecuentemente considerada ibérica, a pesar de contar con un número reducido de muestras, se detectó la presencia de cuatro haplotipos distintos, dando muestra de su heterogeneidad, entre estos alelos destacó la presencia del haplotipo MC1R*4, alelo fijado en la raza Duroc, lo que hace suponer que durante la recuperación de esta población intervino algún animal con ascendencia Duroc. El gen Agouti ha sido objeto de estudios previos en diversas razas de cerdo detectándose la presencia de tres mutaciones, pero en ningún caso se ha podido establecer asociación con ningún patrón de color, a pesar de su importante papel en el proceso de melanogénesis. En este trabajo el gen se ha analizado a través de secuenciación directa del producto de amplificación de la secuencia completa de los cuatro exones que los constituyen junto a las regiones intrónicas adyacentes, en total se han secuenciado 1537 pb en 7 poblaciones y razas porcinas. El resultado de este análisis ha permitido detectar dos polimorfismos, una inserción en el intrón 1 y una transversión en el exon 3, sin embargo ninguno de estos polimorfismos ha podido asociarse con ninguno de los patrones de color analizados. Hasta la realización del presente trabajo, el gen Pink no había sido caracterizado ni localizado en la especie porcina. El gen Pink tiene una estructura compleja, en la especie humana y ratón esta constituido por 25 exones, por lo que se ha realizado su análisis sobre ADN copia procedente de muestras de ARN de piel. El análisis del mismo se ha realizado mediante secuenciación del ADNc a través del diseño de oligonucleótidos en las regiones mejor conservada entre la especie humana y ratón y empleando la metodología RACE para la caracterización de los extremos 5' y 3', lo que llevó a determinar la secuencia completa del ADNc y del intrón 9. Posteriormente se ha realizado su localización física, empleando un panel de células híbridas irradiadas, y genético o de ligamento a través de la construcción de un mapa de ligamiento, quedando localizado en el cromosoma 15 (q21-q22) y aportando nueva información al mapeo comparativo humano-cerdo. En total se han caracterizado y analizado 3267 pb del ANDc y 2242 pb del intrón 9, detectándose 10 polimorfismos en el ADNc en 20 muestras de piel analizadas pertenecientes a las razas Landrace, Large White, Duroc, Vietnamita, Meishan e Ibérico (negro, rubio, colorado y entrepelado) y jabalí y 4 polimorfismos en el intrón 9 en 12 muestras analizadas pertenecientes a las razas Large White, Duroc, Ibérico (negro, rubio, colorado y entrepelado). De estos polimorfismos, los que presentaron interés bien por producir cambio aminoacídico y aparecer en muestras con un patrón de color concreto o bien por ser candidatos como marcadores raciales fueron genotipados en un mayor número de muestras (metodologías PCR-RFLP, PCR-SSCP, PCR alelo-específica). Del resultado del genotipado de estos polimorfismos no se pudo establecer una asociación directa con ningún patrón para el color, ya que ninguno de estos aparece fijado. Sin embargo, durante el genotipado de animales pertenecientes a poblaciones de la raza ibérica también se detectó la introgresión de genes pertenecientes a otras razas porcinas en las mismas poblaciones en las que se detectó introgresión para el gen MC1R. Por otro lado, en la línea Ibérica Torbiscal se realizó un análisis de asociación de los polimorfismos detectados en los genes MC1R y Pink (MC1R: alelos MC1R*3, MC1R*6, MC1R*7; Pink: posición 510 del exón 4, posición 2040 del exón 18 y posición 1920 del intrón 9), con la pigmentación de la piel medida mediante un espectrocolorímetro. En este análisis se detectó un efecto estadísticamente significativo entre el polimorfismo localizado en la posición 1920 del intrón 9 del gen Pink con la intensidad de color medida a través del parámetro L (luminosidad), y este efecto consiste en un aumento de la luminosidad por tanto una disminución en la cantidad de color en los individuos heterocigotos frente a ambos homocigotos. Dado el antecendente en humano en el que se había detectado asociación de la interacción de dos polimorfismos en los genes MC1R y Pink con la pigmentación de la piel en una población humana vietnamita, se realizó un análisis de asociación de la interacción de los polimorfismos anteriormente mencionados en la población de cerdos ibéricos de la línea Torbiscal con el color de la capa, detectándose un efecto próximo a la significación estadística entre la interacción del polimorfismo del gen MC1R y el polimorfismo localizado en la posición 510 del exón 4 del gen Pink con la intensidad de color medida a través del parámetro L. Como aplicación de los resultados del análisis de los polimorfismos de estos genes se planteó su emplo como marcadores raciales. Se ha comprobado su utilidad como marcadores raciales de Duroc frente a ibérico, por su facilidad de genotipado y elevada informatividad, el polimorfismo localizado en posición 1556 que constituye el haplotipo MC1R*4 fijado en la raza Duroc y ausente en la raza Ibérica y el polimorfismo localizado en posición 2462 del gen Pink a frecuencia elevada en la raza Duroc (0.755) y ausente en la raza Ibérica. Además los protocolos de genotipado fueron verificados tanto en muestras de sangre como en productos curados. Por otro lado, se ha calculado que con la información aportada por estos polimorfismos junto con información disponible de otro tipo de marcadores (microsatélites y AFLPs) es posible la exclusión del origen ibérico de un animal de genotipo /4 ó 3/4 Duroc, o de carne o productos elaborados con materia prima del mismo. Un segundo ejemplo aplicado es el emplo del polimorfismo del gen MC1R (inserción -CC- en posición 896 del gen) como marcador genético en el extremo del mapa de ligamiento del cromosoma 6 en un cruce experimental Ibérico y Landrace. Lo que permitió, junto a la información procedente de la incorporación de un mayor número de microsatélites, confirmar la existencia de dos QTL detectados en trabajos previos para los caracteres área del lomo y porcentaje de grasa intramuscular, afinadndo las posiciones de los mismos y aumentando la potencia de detección. Por otro lado, para los caracteres porcentaje de ácido palmítico, palmitoleico y esteárico este mapeo de alta densidad permitió afinar las posiciones de los ATL sugestivos detectados en un trabajo anterior, principalmente para el ácido palmitoleico. En segundo lugar la aplicación de un modelo de análisis estadístico de detección de QTL para pares de carecteres permitió concretar los efectos y posiciones de estos QTL, detectándose dos QTL ligados, uno con efecto sobre el porcentaje de ácido palmítico y otro con efectos pleiotrópicos sobre el porcentaje de ácido palmitoleico y esteárico.
  • CARACTERIZACIÓN GENÉTICA DEL CABALLO PANTANEIRO .
    Autor: TAVARES-PIRES DE SOUZA SERENO FABIANA.
    Año: 2002.
    Universidad: CORDOBA.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: En este trabajo se ha estudiado la zona Pantaneira partiéndose de una revisión histórica de su origen para identificar posibles razas caballares que pudieron influir en su formación. Se utilizó una batería de 12 microsatélites para la caracterización genética del núcleo de la raza Pantaneira y además para estudios comparativos con las razas Pura Raza Español (PRE), Pura Sangre Ingles (PSI), Árabe y Criollo Uruguayo con el fin de contrastar los datos históricos. Finalmente se realizó un análisis genealógico para la verificación de las informaciones de registro genealógico procedentes de este núcleo. Los resultados indican que la población del caballo Pantaneiro estudiada se presenta genéticamente bien estructurada con un elevado grado de diversidad genética, claramente definida frente a otras razas y se confirman las teorias históricas sobre el origen ibérico de la raza. La rotación de sementales adoptada en el manejo del núcleo viene favoreciendo el aumento de la variabilidad genética. Los valores de distancia genética obtenidos para las cinco poblaciones estudiadas y el análisis de la distancia individual sitúan al caballo Pantaneiro con una entidad propia a pesar de la gran variabilidad genética descrita. La batería de marcadores empleada fue eficiente para realizar las pruebas de genealogía detectando dos errores de asignación Madre/Hijo y uno Progenitor/Hijo, posibilitando también la resolución de los mismos. Finalmente se indica la utilización de los marcadores genéticos en el control de los registros genealógicos, planes de conservación y mejora de la raza Pantaneira.
  • GENETIC POLYMORPHISM IN GOAT. STUDY OF THE KAPPA CASEIN, THE BETALACTOGLOBULIN, AND THE STEAROYL COENZYME A DESATURASE GENES .
    Autor: YAHYAOUI MOHAMED HABIB.
    Año: 2002.
    Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.
    Resumen: Mediante la técnica BESS de detección de mutaciones y secuenciación, se ha estudiado el polimorfismo genético en varias razas caprinas españolas, francesas e italianas. Las regiones analizadas fueron la región promotora y el inicio del exón 1 para el gen de la beta-lactoglobulina (beta-LG), la totalidad de la región codificante de la kappa caseina (k-CN) incluida en los exones 3 y 4, y la totalidad del exón 5 de la stearoyl coenzyma A desaturasa (SCD). Un total de diez mutaciones, de los cuales 4 son sinónimas (una en el exón 3 y tres en el exón 4), han sido detectadas en la región codificante del gen de la kappa caseína. Las otras seis mutaciones producen cambios amino acídicos, resultando en siete variantes genéticas, denominadas A, B, C, D, E, F y G. Un protocolo de genotipado de todas las variantes ha sido desarrollado, utilizando la técnica de primer extensión analysis. Los alelos A y B son los más comunes, presentes en la mayoría de las razas analizadas siendo la variante B la predominante en todas ellas, con la excepción de la raza Canaria dónde el alelo A es lo más presente. La variante F es especialmente presente en la cabra pirenaica. La comparación de las secuencias sugiere que el alelo F es probablemente el alelo ancestral de la kappa caseína. Los otros alelos derivaron de este tipo original según dos truncos distintos. El análisis de la beta-LG muestra la presencia de una mutación en la región proximal del promotor (posición -60 desde el inicio de la transcripción). Las frecuencias observadas de este polimórfismo son similares en las razas analizadas (Murciano-Granadina, Malagueña, Payoya, y Saanen) excepto la Canaria dónde este polimórfismo está ausente, lo cual puede estar relacionado con el origen diferente de esta raza. La secuencia obtenida del ADNc de la SCD caprina contiene un marco de lectura de 1080 pb que codifica para una proteína de 359 aminoácidos y un codon de terminación TGA, así como las regiones son codificantes 5' y 3' de 172 y 654 pb respectivamente. La secuencia nucleotídica de la región codificante es muy similar a la observada en ovino (98%) y en bovino (95%). La unidad de transcripción del SCD caprino es del orden de 15 Kb. La organización estructural del gen es muy similar a las descritas en roedores y en humano, y consiste en 6 exones y 5 intrones. Varias posiciones polimorficas han sido detectadas en el exón 5 y la región 3' no codificante. El polimorfismo tipo RFLP en la posición 931 del ADNc ha sido utilizado para mapear el gen mediante el análisis de ligamiento en el cromosoma 26q13-q21.
  • ESTRUCTURA GENÉTICA DE LAS POBLACIONES DE CETÁCEOS DEL ARCHIPIÉLAGO CANARIO: SECUENCIACIÓN DE LA REGIÓN CONTROL Y LOS GENES COI Y NADH5 DEL ADN MITOCONDRIAL .
    Autor: HILDEBRANDT SILVIA .
    Año: 2002.
    Universidad: LAS PALMAS DE GRAN CANARIA.
    Centro de lectura: CIENCIAS DEL MAR.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS DEL MAR.
    Resumen: En el presente trabajo se realiza un estudio de la estructura de poblaciones en cuatro especies de cetáceos del Archipiélago Canario desde un punto de vista genético. Dos de las especies son residentes, el delfín mular (Tursiops truncatus) y el calderón tropical (Globicephala macrorhynchus) y la sotras dos, son especies transeúntes, el delfín común (Delphinus delphis) y el rorcual tropical (Balaenoptera edeni). Para estas especies, se han secuenciado aproximadamente 400 pares de bases (pb) de un marcador mitocondrial, la región control o D-loop. Además, para un total de 9 especies de cetáceos, 7 odontocetos y 2 misticetos, se han secuenciado dos genes mitocondriales, el COI y el NADH5, que hasta el momento no habían sido descritos para la mayoría de ellas, con el fin de establecer las relaciones filogenéticas entre las mismas. En la región D-loop, los valores de diversidad nucleotídica fueron del 1,7% en el delfín mular, del 0,4% en el calderón tropical, del 1,5% en el delfín común y no se halló variabilidad en las muestras de rorcual tropical analizadas. Se encontraron 31 haplotipos distintos en las 42 muestras del delfín mular. Todos ellos fueron exclusivos del Archipiélago Canario. En el calderón tropical el número de haplotipos fue 11 en 33 muestras analizadas. Uno de ellos coincidió con un haplotipo descrito para el Océano Pacífico. Para las 28 muestras de delfín común se describieron 21 haplotipos, coincidiendo uno de ellos con un haplotipo hallado previamente en el Mar Negro. El único haplotipo hallado en las 8 muestras de rorcual tropical, que es la primera descripción genética de esta especie en el Océano Atlántico, fue igual a uno del Océano Índico. La población canaria del delfín mular está subdividida en dos grupos atendiendo a la afinidad que muestra hacia otras poblaciones descritas previamente. Así, el grupo Canarias Tt-1 está más relacionado con poblaciones atlánticas mientras que el grupo Canarias Tt-2 es más cercano a poblaciones chinas. Los valores de distancia genética de la población canaria con otras poblaciones de los morfotipos Tursiops truncatus y Tursiops aduncus apoyan la teoría de que ambos podrían ser especies distintas. En el calderón tropical se ha comprobado la existencia de dos grupos genéticamente distintos que tienen cierta correspondencia con las área de muestreo Tenerife y Gran Canaria, pero entre los que existe flujo genético puesto que comparten los haplotipos más frecuentes. Para esta especie se ha detectado en Canarias, una variabilidad genética 8 veces superior a la descrita para las poblaciones atlántica y pacífica lo que podría indicar un signo de primitivismo. El delfín común en Canarias está estructurado en dos subgrupos, Canarias Dd-1 y Canarias Dd-2, más relacionados con muestras del Mar Negro/Medieterráneo y muestras de California/Océano Pacífico, respectivamente, que entre ellos. El valor de distancia genética entre estos dos subgrupos fue del mismo orden de magnitud que el definido entre los morfotipos Delphinus delphis y Delphinus capensis que viven en simpatía en California, por lo que no da soporte a la hipótesis de que puedan ser especies distintas. La secuenciación de la región control se erigió como una herramienta útil para la clasificación de un ejemplar de zifio como perteneciente a la especie Mesoplodon europaeus algo que no pudo realizarse previamente por técnicas de fotoidentificación. La diversidad nucleotídica dentro del orden Cetacea fue de un 11,7% para el gen COI y de un 13,3% para el gen NADH5. En este último gen se han econtrado varias deleciones en diferentes especies (delfín mular, delfín común, delfín listado y calderón tropical) que lo hacen disfuncional. Tanto el COI como el NADH5 son válidos para establecer relaciones filogenéticas interfamiliares. Sin embargo, sólo el COI es capaz de resolver de forma adecuada la variabilidad intra e interespecífica en el orden Cetacea. El análisis de ambos genes apoya la hipótesis que establece que no existe origen monofilético de las familias Physeteridae y Balaenopteridae.
  • CAMBIOS GENÓMICOS Y FUNCIONALES ASOCIADOS A LA TRANSICIÓN DEL LINAJE BACTERIANO DE BUCHNERA APHIDICOLA, DESDE LA VIDA LIBRE A LA ENDOSIMBIOSIS CON PULGONES (STERNORRHYNCHA: APHIDIDAE) .
    Autor: SABATER MUÑOZ BEATRIZ.
    Año: 2002.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO DE GENÉTICA DE LA UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.
    Resumen: Los pulgones mantienen una estrecha relación simbiótica con Buchnera aphididae desde hace unos 200 millones de años. La relación es estricta, pues ni pulgón ni bacteria puden vivir de forma no simbiótica. La bacteria suministra aminoácidos esenciales y el pulgón proporciona un ambiente estable. B.aphidicola ha modificaco profusametne su genoma siguiendo cuatro pautas: reducción genómica, incremento contenido A+T, proliferación de plásmidos y acelerando su tasa evolutiva. Este trabajo realiza el estudio comparativo de B.Aphidicola con otras bacterias de vida libre, centrándose en estos cuatro puntos: B.aphidicola presenta los genes Leucina en dos localizaciones: plasmática y cromosómica. La evolución de este cluster es compleja, encontrándose múltiples retrotransferencia desde un plásmido ancestral al cromosoma. La historia filogenética de la bacteria se intenta resolver con el estudio de la evolución molecular del operon groE. Se ha demostrado que la proteína PDT de B.aphidicola no se inhibe por fenilalalina, pudiendo sobreproducir este aminoácido para suplir la deficiente dieta de los pulgones.
  • REGULACIÓN DEL FACTOR DE TRANSCRIPCIÓN TWIST DURANTE MIOGÉNESIS EN DROSOPHILA .
    Autor: CASTAÑÓN ORTEGA MIRNA IRINKA.
    Año: 2002.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA.
    Resumen: Twist, un factor de transcripción del tipo hélice-lazo-hélice básico (bHLH), regula la adquisición de diferentes destino celulares durante el desarrollo del mesodermo en Drosophila. Inicialmente. Twist se expresa uniformemente en la región ventral del embrión en estadio de blastodermo celular. En este momento, Twist le requiere para inducir el mesodermo durante la gestrulación. Posteriormente, la expresión de Twist se modula de manera que, en cada segmento mesodérmico, la región posterior expresa altas concentraciones de la proteína, mientras que la región embrión expresa bajas concentraciones. Experimentos de ganancia y pérdida de función del gen Twist indican que se necesitan altas concentraciones de la proteína para la diferenciación de las células mesodérmicas como músculos somáticos. Para investigar las bases moleculares de este requerimiento hemos llevado a cabo experimentos in vitro e in vivo. Estos experimentos indican que Twist forma homodímeros capaces de inducir el mesodermo y activar el proceso miogénico, mientras que heterodímeros entre Twist y otra proteína del tipo bHLH, Daughterless (Da) reprmien dicho proceso en el mesodermo. Sorprendentemente, estos heterodímeros son capaces de activar la transcripción de genes específicos de músculos cuando se expresan ectópicamente en el ectodermo. Análisis de los dominio de la proteína Da indican que contiene un dominio represor responsable de esta función opuesta de los heterdímeros Twist/Da.
  • DESARROLLO DE UN SISTEMA DE VALORACIÓN GENÉTICA PARA LA LONGEVIDAD EN GANADO FRISÓN ESPAÑOL .
    Autor: CHIRINOS ZULEIMA CHIRINOS.
    Año: 2002.
    Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
    Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
    Centro de realización: E.T.S.I. AGRÓNOMOS.
    Resumen: Se utilizan las técnicas del análisis de supervivencia para estudiar la longevidad de la vida productiva del ganado vacuno Frisón. Mediante estas técnicas es posible realizar una evaluación genética más temprana del animal y realizar una modelización más correcta de factores ambientales mediante modelos no lineales que incorporen el uso de covariables que modifiquen su efecto con el tiempo. La medida de longevidad se define, para cada animal, como el número de días entre el primer parto y el último control lechero registrado, que se asume como fecha de eliminación. El análisis se realiza para las Comunidades Autónomas de Andalucía, Cataluña, Galicia y el País Vasco representativas de distintos ambientes de productivos. En primer lugar se define un modelo de evaluación genética en el que se exploran las posibles diferencias en la estimación de efectos genéticos y no genéticos bajo distintos ambientes. Se analiza la premisa del modelo de Weibull así como el modelo de riesgos proporcionales. Entre los efectos ambientales analizados, los efectos Rebaño-Año-Epoca de parto y número de lactación-Estado de lactación fueron los que más contribuyeron a explicar las diferencias en el riesgo relativo del desecho. Las estimas de las heredabilidades obtenidas oscilaron, para las distintas comunidades autónomas, en el rango de 0.048 y 0.098. En segundo lugar se evaluó la posibilidad de utilizar la longevidad en cada lactación en lugar la longevidad global con objeto de identificar mejor los factores que actúan en cada tramo de la vida productiva del animal. Los resultados obtenidos indican que esta aproximación proporciona un mejor ajuste y permiten obtener mayores diferencias en el riesgo relativo entre clases. Por último, se anlaizó si los caracteres morfológicos y el recuento de células somáticas estaban relacionados con el riesgo de desecho, para determinar su posible utilización en una eventual mejora de la precisión de la evaluación de la longevidad. Todos los caracteres morfológicos, excepto profundidad de la ubre y algunos caracteres de capacidad corporal, mostraron más relación con la medida de longevidad global, que con la longevidad funcional, indicando una mayor influencia en el desecho voluntario por baja producción lechera. Por el contrario la profundidad de la ubre y los caracteres de capacidad corporal parecen estar relacionados con la longevidad a través del desecho voluntario. De todos los caracteres, aquellos que describen la morfología mamaria fueron los que mostraron un claro efecto sobre el riesgo de desecho. En cuanto el recuento de células somáticas, un incremento en los niveles de esta variable resultó en un rissgo mayor de desecho. Se observó un efecto marcado de la asociación entre el recuento de células somáticas y profundidad de la ubre de forma que el riesgo de desecho es mayor nivel de células somáticas y en quellos animales con ubres más profundas.
  • EVOLUCIÓN DEL DNA SATÉLITE EN FORMICIDOS (HYMENOPTERA, FORMICIDAE) .
    Autor: CARRILLO ÁVILA JOSÉ ANTONIO.
    Año: 2002.
    Universidad: JAEN.
    Centro de lectura: CIENCIAS EXPERIMENTALES.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES.
    Resumen: Se estudian las características y evolución del DNA satélite presente en diversas especies de los géneros "Messor" y "Formica". En algunas de las especies estudiadas de ambos géneros se ha detectado la presencia de dos elementos genéticos móviles, uno de tipo MITEs (Miniature Inverted-repeats Transposable Elements) y otro de tipo "Mariner" perteneciente a la subfamilia "mauritanica". Se estudian las características de ambos y su posible relación con la evolución del DNA satélite en las especies estudiadas.
  • EVOLUCION DE LOS CROMOSOMAS B DEL SALTAMONTES EYPREPOCNEMIS PLORANS EN MARRUECOS .
    Autor: BAKKALI MOHAMMED.
    Año: 2001.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Resumen: Nueve poblaciones de saltamontes Eyprepocnemis plorans localizadas en el noroeste de Marruecos (Smir, Asilah, Larache, Ain l´abid, Tatouft, Frain, SO.DE.A., Mechra y Rabat) fueron muestreadas a lo largo de tres años (1995,1996,1997). Todas resultaron albergar el polimorfismo para los cromosomas B. La determinacion, mediante tecicas de bandeo cromosomico e hibridacion "in situ" fluorescente, de la naturaleza de las ocho variantes de cromosomas B encontradas en estas poblaciones reveló que los cromosomas B de Marruecos estan, mayoritariamente, compuestos por los mismos tipos de ADN(ribosómico, y repetitivo de 180 pb) que los cromosomas B encontrados en España. Esto permitio interpretar que estos cromosomas podrian tener un origen comun. El cromosoma B mas frecuente era BM1(muy similar al B1 de las poblaciones ibericas [Henriques-Gil y col., 1984a]), por lo que se ha considerado como el B original en Marruecos. Las tecnicas mencionadas han revelado tambien que, con excepcion de la falta de ADN repetitivo en la parte paracentromerica del autosoma S10, de la disposicion al reves de las sondas de ADN ribosomico y repetitivo del atosoma S11 y de la actividad de las NORs secundarias localizadas en los autosomas L1-M8 de los especimenes de Marruecos, los cromosomas A y B de los especimenes de Marruecos y España no muestran mayores diferencias. La frecuencia estimada de los Bs en las poblaciones estudiadas resulto ser relativamente baja (entre 0.125 y 0.526), y el analisis de la evolucion espacio-temporal de la frecuencia BM1 mostro que no era significativamente diferente entre las nueve poblaciones estudiadas ni a lo largo de los tres años de muestreo. Tras el analisis de la transmision de los Bs en las poblaciones de Smir, SO.DE.A y Mechra. Solo el cromosoma BM1 de la poblacion situada mas al sur (Mechra) se acumulaba a traves de las hembras. Según el modelo evolutivo propuesto por Camacho y col. (1997b), el polimorfismo para los cromosomas B estaria en una fase evolutiva mas temprana en la poblacion de Mechra que en las dos situadas mas al norte. Solo una variante de Bs minoritarios, encontrada en individuos de Smir y SO.DE.A., mostro acumulacion (kb>0.7) y se parecia en tamaño y patron de bandas C al B24 que substituyó B2 en la poblacion española de Torrox (Zurita y col., 1998). En base a estos resultados se han estimado que existen algunas posibilidades de substitucion del cromosoma BM1 por otra variante Bs. Teniendo en cuenta, ademas, la menor incidencia de variantes minoritarias de cromosomas B en Mechra, se consideró que el polimorfismo debe ser mas reciente en esta poblacion que en las dos situadas mas al norte, y por tanto, que los cromosomas B marroquies derivan de la orilla norte del mediterraneo. La alta mutabilidad de los cromosomas B quedo demostrada por la aparicion de algunos embriones con nuevos tipos de cromosomas B orignados "de novo" a partir de los cromosomas B que sus progenitores llevaban, asi como por la aparicion de translocaciones entre los cromosomas B y los cromosomas A. Se han estudiado los posibles efectos de los Bs sobre la actividad de las regiones organizadoras de nucleolos, la frecuencia media de quiasmas, el numero de huevos por puesta, la fertilidad de estos huevos y el tamaño corporal. Los Bs aumentaban la actividad de la NOR del cromosoma X, pero el efecto mas notorio fue el incremento de la frecuencia de quiasmas en los machos portadores de estos cromosomas, que es compatible con el incremento en recombinacion, predicho por la Teoria de la Recombinacion Inducible, asociado al estrés causado por los cromosomas B parasitos. Tras la realizacion de unas simulaciones de la dinamica de poblaciones de los cromosomas B bajo diferentes condiciones de costo de estos cromosomas sobre la eficacia biologica ("fitness"), se ha deducido que la baja frecuencia de los cromosomas B en las poblaciones marroquies podria deberse a un costo en "fitness" de 0.1 por cromosoma B. Teoricamente, las translocaciones reciprocas entre cromosomas A y B podrian ser una de las vias de integracion del ADN de los cromosomas B en el genoma A. No obstante, los resultados del analisis de la naturaleza, comportamiento meiotico y de progenies de una translocacion entre el cromosoma BM8 y el autosoma M4 sugieren que esta posibilidad esta muy limitada por la importante disminucion en la fertilidad provocada por la letalidad derivada del comportamiento meiotico del intercambio.
  • EXPRESION GENICA DURANTE EL DESARROLLO GONADAL DE TALPA OCCIDENTALIS.
    Autor: BARRIONUEVO JIMENEZ FRANCISCO JAVIER.
    Año: 2001.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
    Resumen: Las hembras del topo iberico, Talpa occidentalis, presentan un caso de reversion sexual, ya que en lugar de ovarios normales presentan ovotestes bilaterales, con una region con caracteristcas de tejido ovarico normal y otra region de tamaño variable, con caracteristicas de tejido testicular disgenesico. Los testiculos masculinos son invariablemente normales. Dada las caracteristicas tan excepcionales que presentan estas hembras, en el presente trabajo se ha realizado el estudio de la organogenesis gonadal en esta especie, asi como la expresion de genes implicados en la diferenciacion determinacion sexual. Para ello hemos tenido que desarrollar tecnicas para la obtencion de embriones, crias y fetos de topo, asi como para el mantenimiento de estos animales en alojamientos artificiales. Asi, hemos comprobado que el desarrollo testicular de los machos del topo Talpa occidentalis se realiza según el patron comun en otras especies de mamiferos, y los genes SRY, DAXI y SOX9 se expresan de forma ininterrumpida durante todo el desarrollo prenatal de los testiculos XY de topo, un perfil de expresion bastante distinto del de especies tales como rata y raton. La expresion continuada de SRY explica que la de de DAXI no tenga ninguna consecuencia negativa en el desarrollo testicular. El topo es el unico mamifero en el que el primer signo de diferenciacion sexual aparece en las hembras, en lugar de en los machos, ya que en un estudio precoz se observa un septo de tejido que defiine una region cortical y otra medular, cosa que no ocurre en el macho del mismo estadio. El desarrollo del tejido ovarico de los ovotestes de las hembras de topo tiene un desarrollo normal al compararlo con otras especies de mamiferos. El tejido testicular de los ovotestes del topo es ontogeneticamente homologo del de los testiculos de los machos, y se desarrolla siguiendo un patron identico al del tejido testicular XY, aunque una velocidad inferior. En consecuencia, estos animales son hermafroditas verdaderos desde un punto de vista fenotipico. La presencia del tejido testicular XX en estas gonadas permite hablar de reversion sexual XX en las especies del genero Talpa. La expresion del gen SOX9 durante todo el proceso de formacion del tejido testicular de los ovotestes de las hembras de topo apunta hacia este gen como el responsable de la induccion del desarrollo testicular. La presencia de celulas germinales primordiales XX en la region cortical, pero no en la region medular de la gonada femenina de topo desde los primeros estadios del desarrollo, sugiere que la presencia de estas celulas germinales primordiales XX en la region cortical, pero no en la region medular de la gonada femenina de topo desde los primeros estadios del desarrollo, sugiere que la presencia de estas celulas conlleva la represion, en lascelulas preSertoli, de genes necesarios para el desarrollo testicular. Entre estos genes estaria SOX9. El patron de expresion de DAXI en las gonadas XX de topo sugiere que, en ausencia de SRY, DAXI es capaz de reprimir en las celulas pre-Sertoli su capacidad para indcir la diferenciacion de las celulas de leydig, pero no la de inducir la migracion, la formacion de cordones, la vascularizacion y la formacion de la tunica albuginea.
  • ANALISIS ALOZIMICO DE POBLACIONES EUROPEAS DE PECES ESPARIDOS (SPARIDAE), CON ESPECIAL ENFASIS EN LA DORADA (SPARUS AURATA) .
    Autor: ALARCÓN URBISTONDO JOSE ANTONIO.
    Año: 2001.
    Universidad: MALAGA.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: UNIVERSIDAD DE MÁLAGA - FACULTAD DE CIENCIAS.
    Resumen: En este estudio se analizan una serie de parámetros poblacionales de 8 especies de peces de la Familia Sparidae: (Sparus aurata, Pagrus pagrus, Diplodus puntazzo, Diplodus sargus, Lithognathus mormyrus, Pagellus bogaraveo, Dentex dentex y Spondyliosoma cantharus). Para ello se emplean 22 loci aloenzímicos en dorada (Sparus aurata) y 18 en el resto de especies. Se estudiaron los parámetros más habituales de variabilidad, sus condiciones respecto al equilibrio de Hardy-Weinberg y la estructuración geográfica que presentaban cada una de las especies. Además se realizó un análisis más detallado de la comparación de las muestras de doradas silvestres y cultivadas. De cada especie se analizaron muestras de poblaciones de Portugal, España (Mediterránea y Atlántica), Italia y Grecia. Para Sparus aurata se analizaron además muestras de estos mismos orígenes provenientes de cultivo. Los resultados demuestran que la técnica de aloenzimas es útil para revelar diferencias intra e interespecíficas de las especies de Espáridos analizadas. Los niveles de variabilidad encontrados están en el rango del de otros peces marinos. La dorada presenta los valores de variabilidad más altos. Todas las poblaciones naturales de las 8 especies analizadas se encuentran en equilibrio HW. En cuánto a la diferenciación geográfica según su estructura poblacional se pueden establecer los siguientes tipos: 1,- Diferenciación Atlántico-Mediterráneo (D. Dentex, I.mormyrus y P.pagrus). 2,- Diferenciación Atlántico-Mediterráneo, junto con variación clinal mediterránea (D.puntazzo). 3,- Diferenciación poblacional, pero sin patrón geográfico definido (S.aurata y P.bogaraveo). 4,- Sin diferenciación geográfica (D.sargus y S.cantharus). La filogenia obtenida en base a distancias genéticas, revela agrupaciones estrechas entre P.pagrus-D.dentex y entre L.mormyrus-P.bogaraveo. Con esta última agrupación se relacionan D.sargurs y D.puntazzo y formando una rama independiente, los hace S.cantharus. En cambio S.aurata no aparece integrada en las agrupaciones anteriores. Las poblaciones cultivadas de dorada no presentan diferencias significativas en el grado de variabilidad respecto a las correspondientes silvestres.
  • DIFERENCIACIÓN DE POBLACIONES DE TRUCHA COMÚN (SALMO TRUTTA L.) PROCEDENTES DE AMBIENTES TÉRMICOS CONTRASTADOS .
    Autor: CANO ARIAS JOSÉ MANUEL.
    Año: 2001.
    Universidad: OVIEDO.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA .
    Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD DE OVIEDO.
    Resumen: La presente memoria estudia la variación en rasgos relacionados con la eficacia biológica en la trucha común (Salmo trutta L.) como son la capacidad de crecimiento, el tiempo de desarrollo, la capacidad de natación y la tasa metabólica estándar. Para ello se han realizado una serie de diseños de genética cuantitativa y experimentos en ambiente común con descendientes obtenidos de poblaciones de trucha a lo largo de un gradiente altitudinal. Esta diferencia altitudinal determina diferentes temperaturas en los ríos de origen, condicionando las oportunidades de crecimiento en cada población. Los resultados presentados sugieren que las diferentes respuestas fenotípicas entre poblaciones tienen una base genética y alto potencial evolutivo. La variación en cuanto a tasas metabólicas encaja en lo esperado en un marco de adaptación local y condiciona otros rasgos como la probabilidad de supervivencia y la capacidad de natación para las poblaciones estudiadas.
  • EVALUACIÓ DE LA GENOTOXICITAT EN EL MEDI TERRESTRE: UTILITZACIÓ DE L'ELECTROFORESI DE CÉL-LULES INDIVIDUALS EN GELS D'AGAROSA (COMET TEST, O SCGE) .
    Autor: DELGADO SUREDA EULÁLIA .
    Año: 2001.
    Universidad: BARCELONA.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA.
    Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA - UNIVERSIDAD DE BARCELONA.
    Resumen: Estudio de la evaluación de la posible contaminación de tipo genotóxico en el vertedero de Garraf (Barcelona). Vertedero que recoge los residuos urbanos de Barcelona y sus alrededores. El estudio se realiza llevando a cabo el Comet Test (o SCGE) y el Test de los Micronúcleos (MNT) en muestras de sangre de Apodemus sylvaticus (capturados en tres áreas distintas del vertedero, y en una zona control lejos de la influencia de éste y perteneciente al Parque Natural del Garraf). Al mismo tiempo, se aplica la técnica del Comet test también en muestras de celomocitos de ejemplares de Allolobophora caliginosa expuestos a suelos pertenecientes al vertedero (5 zonas a distintas distancias de éste), y a unos controles (de una zona control del Parque Natural del Garraf, y de una tierra preparada en el laboratorio) durante cinco días. Para las dos especies utilizadas y los dos ensayos realizados se obtienen valores mayores de daño en el DNA en las muestras de las zonas de influencia del vertedero respecto a las muestras controles. No se puede establecer en el caso de los lumbrícidos, una relación del nivel de daño con la distancia al vertedero (esperando que disminuyera y se acercara a los valores control cuanto más lejos del vertedero). Otro estudio estuvo centrado en la evaluación de la contaminación de tipo genotóxico en muestras de suelo de Doñana, recogidas en el año 2000 en distintas zonas afectadas por el vertido tóxico del accidente de las mismas de Aznalcóllar (que se produjo en el 1998), con la exposición a dichas muestras de varios ejemplares de Allolobophora caliginosa, y con la realización del SCGE en celomocitos. Al mismo tiempo se compararon con la concentración de metales pesados. Debido a las características de estos suelos, pH ácidos, y elevada carga de metales, hubo que hacer diluciones de algunas muestras ya que los animales no podían vivir en estas condiciones. Así los resultados son difíciles de interpretar debido a estas diluciones. A pesar de estos problemas, las muestras contaminadas por el vertido tóxico y las muestras de referencia de la misma zona (supuestamente no afectadas por el vertido) muestran valores superiores con el Comet test a las muestras control .. Aunque debe tenerse en cuenta que esta zona ha estado afectado durante muchos años por la actividad de la mina, así como también debe considerarse que el vertido tuvo otros tipos de contaminantes (como aminas aromáticas, etc…) a parte de los metales pesados. Una parte muy importante del estudio se ha basado en los aspectos técnicos del ensayo del cometa (Comet test), para poder conocer un poco más su funcionamiento a nivel fisiológico y molecular. Así se han realizado varios estudios in vitro e in vivo para ver la posible interferencia de la división celular en los resultados de SCGE (basados en la sincronización de células y cuantificación de células en fase S por citometria de flujo, y la estimulación de la regeneración en lumbrícidos, entre otros experimentos). Otras pruebas han estado dirigidas a ver la relación que pueda existir entre los resultados del SCGE y los estados de apoptosis y necrosis de las células, que pueden también causar una interferencia en los resultados del ensayo. Al mismo tiempo se discute también la posibilidad de investigar si se trata de fragmentos de DNA, o loops, o las dos cosas a la vez, lo que realmente estamos obteniendo con estas imágenes de cometa. Se han realizado varias discusiones a partir de la metodología usada en el SCGE. Se ha adaptado a los distintos tipos de muestra, a las necesidades de cada caso, y se han ido introduciendo mejoras técnicas. Se comentan también las distintas variaciones de diversos laboratorios. Otro estudio va centrado en el seguimiento de la cinética de reparación, muy importante también en estudios de valoración de la genotoxicidad de determinadas sustancias.
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