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ESTRUCTURA DE LA PARED CELULAR



8 tesis en 1 páginas: 1
  • PROTEÍNAS DE UNIÓN A PENICILINAS DE ALTO PESO MOLECULAR (HMW-PBPSs) EN Corynebacterium glutamicum ATCC 13032: CARACTERIZACIÓN GÉNICA Y FUNCIONAL.
    Autor: VALBUENA CRESPO NOELIA .
    Año: 2004.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
    Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
    Resumen: Las proteínas de unión a penicilinas de alto peso molecular (HMW-PBPs) intervienen en la biosíntesis de peptidoglicano, concretamente en los pasos de glicosilación (polimerización de las cadenas glicosídicas) y transpeptidación. (formación de puentes peptídicos). Esisten redundancia funcional dentro de estas proteínas, salvo en el caso de ftsI, que se trata de un gen esencial. Se ha analizado esta redundancia funcional y se ha podido interrumpir cada uno de los genes que codifican para HMW-PBPs, salvo ftsI, que en C. glutamicum, al igual que ocurre en otros microorganismos, se trata de un gen esencial para la viabilidad celular. Ya que se obtuvieron mutantes simples con cada uno de los genes interrumpidos y su morfología no aparecía claramente alterada, se obtuvieron mutantes dobles, donde dos genes que codifican para HMW-PBPs se encuentran interrumpidos. Así se obtuvieron todas las posibles combinaciones, salvo el tándem pbp1B-pbp2B que parece ser esencial. Dado que no fue posible interrumpir el gen ftsI, se decidió disminuir los niveles de ftsI en C. glutamicum. Para ello se utilizó el promotor lac (Plac) que se sabe que es un promotor débil en corinebacterias. La cepa obtenida donde la única copia completa de ftsI se encuentra bajo el control de Plac se denominó C. glutamicum RESF1. Esta cepa presentó grandes alteraciones morfológicas. Mediante geles bidimensionales se obtuvieron 22 proteínas que se sobreexpresan en RESF1 con respecto a la cepa silvestre. Una de ellas interviene directamente en el crecimiento apical de C. glutamicum y se denomina DivIVA. Este aumento de expresión fue comprobado al fusionar traduccionalmente DivIVA a GFP en la cepa RESF1. En este caso, loa fluorescencia observada fue mucho mayor que en la cepa control, acumulándose no solamente en los polos celulares (que es la localización normal de DivIVA) sino también en prominentes bandas en el interior de células muy alargadas que no se han dividido. Por lo tanto, podemos concluir que una disminución de los niveles de ftsI, provoca en C. glutamicum un aumento claro en los niveles de DivIVA que se localiza en los polos celulares y en septos en división que no terminan de formarse. El estudio de la localización celular de las HMW-PBPs en C. glutamicum mediante la fusión traduccional de cada una de ellas a GFP, reveló que todas ellas se disponen en el septo de división y en los polos celulares. Esta localización difiere claramente con la localización en otros microorganismos, donde se localizan en el septo y en la pared lateral en lugar de en los polos. Esta diferente localización puede deberse al peculiar modo de crecimiento que presenta C.glutamicum, ya que en este microorganismo, la elongación se produce a partir del septo de división y de los polos celulares, y en el resto de microorganismos, la elongación no es a partir de los pols que son inertes, sino a partir de la pared lateral; por lo tanto, parece lógico pensar que las HMW-PBPs que intervienen en la biosíntesis de peptidoglicano se localicen en los lugares donde se produce el crecimiento, es decir, en los polos y en el septo. La localización de Pbp2A no está clara, parece una localización difusa. En el caso de ftsI, su localización también difiere con la localización de ftsI en otros microorganismos, ya que ftsI es específica de septo de división. En C.glutamicum, además de localización septal, también aparece en los polos, por lo tanto, parece que ftsI podría colaborar en la elongación a partir de los polos apicales, aunque no se puede descartar que esa localización se deba a restos de una antiguo septo de división.
  • ANÁLISIS E IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS IMPLICADAS EN LA BIOSÍNTESIS DE LA PARED CELULAR DE "SACCHAROMYCES CEREVISIAE". CARACTERIZACIÓN DEL GEN "PST1".
    Autor: PARDO CALVO M. MERCEDES .
    Año: 1999.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA UCM.
    Resumen: La pared celular fúngida es una estructura dinámica situada entre la membrana plasmática y el medio extracelular, que resulta esencial para el mantenimiento de la integridad celular. Dado que esta estructura no existe en células eucariotas superiores, un conocimiento más profundo de la misma podría conducir el desarrollo de nuevos agentes antifúngicos de acción selectiva. La estrategia empleada en este trabajo para el estudio de proteínas implicadas en procesos relacionados con la pared celular ha sido el análisis de las proteínas secretadas por protoplastos de Saccharomyces cerevisiae en condiciones de regeneración en medio liquido. La eliminación de la pared celular de las células de levadura en un medio isosmótico y posterior incubación de los protoplastos en condiciones de regenaración permite la expresión de genes implicados en los procesos de construcción de la pared celular. En estas condiciones, numerosas proteínas, entre las que se incluyen proteínas estructurales de la pared celular así como enzimas implicadas en los procesos de construcción y ensamblaje de la misma, son secretadas al medio de cultivo. Las proteínas secretadas por protoplastos de S. Cerevisiae han sido analizadas mediante electroforesis bidimensional, realizándose el isoelectroenfoque en un gradiente de pH inmovilizado. Las manchas proteicas detectadas fueron indentificadas mediante secuenciación aminoterminal, detección con anticuerpos específicos o espectrometría de masas. El trabajo se engloba pues dentro de una disciplina surgida recientemente, a la que se ha dado en llamar Proteómica, que consiste en el estudio en gran escala de los productos génicos de un genoma con el fin de obtener una visión global e integrada de los procesos celulares. Las proteínas identificadas en ese trabajo pueden ser englobadas en distintas categorías de acuerdo a su función biológica. Así, se han identificado proteínas de pared celular propiamente dichas o implicadas en su construcción, enzimas glucolíticas y de la fermentación, proteínas de choque térmico, y otras proteínas relacionadas con funciones diversas. Asímismo se han identificado varias proteínas de función hasta el momento desconocida. Una de las proteínas de función desconocida detectadas, codificada por el gen PST1(de Protoplasts-Secreted), presenta en su secuencia aminoacídica características típicas de proteínas de pared celular. La segunda, parte de esta Memoria expone la caracterización funcional de dicho gen, implicado en la construcción de la pared celular en S. Cerevisiae. Por otra parte, en el presente trabajo se demuestra por primera vez genéticamente que dos enzimas glucolíticas son capaces de dirigir la salida de un péptido intracelular a la superficie celular, apoyando por tanto su identificación entre las proteínas secretadas por protoplastos, y su presencia en la pared celular de esta levadura.
  • IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE MODULOS FUNCIONALES EN LA MEMBRANA CELULAR .
    Autor: ESCRICHE MARCO M. SOL.
    Año: 1999.
    Universidad: BARCELONA.
    Centro de lectura: QUÍMICA.
    Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.
    Resumen: La adenosina es un autocoide que realizas sus funciones a través de su interacción con una serie de receptores situados en la membrana plasmática, uno de los cuales es el receptor A1 se adenosina. Este receptor pertenece a la familia de receptores de siete dominios transmembrana acoplados a proteínas G. Hasta el momento se sabe poco acerca de las posibles interacciones que existen entre receptores de la superficie celular y proteínas citoplasmáticas, extracelulares o proteínas de mambrana. En esta Tesis se describe la interacción del receptor A1 de adenosina con un conjunto de proteínas que regulan su funcionalidad. El receptor A1 interacciona con el enzima adenosina desaminsas ADA. A través de esta interacción, e independientemente de su actividad catalítica, la ADA modifica la afinidad del receptor hacia sus ligandos. Además se ha observado que la adicicón de ADA en el medio extracelular acelera la internalización inducida por agnosta del receptor A1 de tal manera que se produce una internalización conjunta de ambas moléculas a través de caveolas. No obstante,llega un momento en que el receptor y la enzima se segregan y reciclan hacia la superficie celular a través de rutas diferentes ya que el receptor recicla através de vesículas revestidas mientras que la ADA recicla a través de caveolas. El receptor A1 de adenosina interacciona también con la proteína de estrés térmico hsc73. A través de esta interacción la hsc73 disminuye la afinidad del receptor A1 hacia sus ligandos, efecto que es revertido por la ADA. El estudio de la interacción del receptor A1 con proteínas de membrana se ha llevado a cabo en el cerebro, en el cual la adenosina es un importante modulador. Así, se ha caracterizado la expresión del receptor A1 de adenosina en cultivos primarios de neuronas de córtex cerebral de rata y se ha observado que en este sistema del receptor localiza con la ADA en la cara extracelular de la membrana plasmática y con la proteína hsc73 en el citoplasma celular. Asimismo, el tratamiento de estas neuronas con los agonistas del receptor A1, de adenosina y metbotrópico 1 de glutamato induce la internalización homóloga y heteróloga de ambas moléculas.
  • EFECTOS DE LA ELABORACION SOBRE LOS POLISACARIDOS DE LA PARED CELULAR DE LA ACEITUNA Y SU RELACION CON LA TEXTURA.
    Autor: SANCHEZ ROMERO CORAL.
    Año: 1995.
    Universidad: SEVILLA.
    Centro de lectura: FARMACIA .
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ORGANICA Y FARMACEUTICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA ORGANICA.
    Resumen: EL OBJETIVO DE ESTE TRABAJO HA SIDO ESTUDIAR LAS MODIFICACIONES QUE SUFREN LOS POLISACARIDOS DE LA PARED CELULAR DE ACEITUNAS (VAR, MANZANILLA) COMO RESULTADO DE SU ELABORACION PARA VERDE ESTILO SEVILLANO, Y SU RELACION CON LA TEXTURA.PARA ELLO SE HA SEGUIDO EL SIGUIENTE PLAN DE TRABAJO: 1.- TANTO EN FRUTO FRESCO COMO PROCESADO SE AISLA Y FRACCIONA EL MATERIAL DE PARED CELULAR EN SUS POLISACARIDOS CONSTITUYENTES DE ACUERDO CON SUS CARACTERISTICAS DE SOLUBILIDAD, CARACTERIZANDOSE ESTOS POR DISTINTAS TECNICAS ANALITICAS (CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO, DISTRIBUCION DE PESOS MOLECULARES Y ANALISIS DE METILACION). SE ANALIZAN LOS PRINCIPALES CAMBIOS ENCONTRADOS EN DICHOS POLISACARIDOS ESTRUCTURALES. 2.- SE LLEVAN A CABO MEDIDAS DE TEXTURA Y SE CORRELACIONAN LOS RESULTADOS OBTENIDOS DEL ANALISIS ESTRUCTURAL DE LOS POLISACARIDOS DE LA PARED CON LA EVOLUCION DE LA TEXTURA. COMO RESULTADO SE CONSTATA QUE, A CONSECUENCIA DE LA ELABORACION TIENE LUGAR UNA CIERTA SOLUBILIZACION DE LOS CARBOHIDRATOS DE LA PARED EN LOS LIQUIDOS DE PROCESADO, OCURRIENDO PRIORITARIAMENTE UN INTERCAMBIO ENTRE LOS DISTINTOS POLISACARIDOS POR MODIFICACIONES EN SU CARACTERISTICAS DE SOLUBILIDAD. LOS POLISACARIDOS PECTICOS SON LOS MAS AFECTADOS POR EL TRATAMIENTO ALCALINO, MIENTRAS QUE LA CELULOSA Y LOS POLISACARIDOS HEMICELULOSICOS POR EL TRATAMIENTO A ALTO PH Y FERMENTACION. SE DAN POSIBLES EXPLICACIONES PARA RELACIONAR LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON LA EVOLUCION SUFRIDA POR LA TEXTURA.
  • CARACTERIZACION DE PROTEINAS INDUCIBLES POR EL VIROIDE DE LA EXOCORTIS DE LOS CITRICOS (CEVD) EN PLANTAS DE TOMATE BETA-1,3-GLUCANASAS Y UNA PROTEINA DE PARED CELULAR (TLRP).
    Autor: DOMINGO CARRASCO CONCEPCION.
    Año: 1993.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: QUIMICA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR 060A.
    Resumen: EL VIROIDE DE LA EXOCORTIS DE LOS CITRICOS (CEVD) INDUCE EN PLANTAS DE TOMATE UN SINDROME PATOGENICO QUE SE TRADUCE EN UNA RESPUESTA DEFENSIVA Y EN ALTERACIONES DEL DESARROLLO. DENTRO DE LA RESPUESTA DE DEFENSA SE HAN CARACTERIZADO A NIVEL BIOQUIMICO Y DE BIOLOGIA MOLECULAR VARIAS ISOFORMAS DE BETA-1,3-GLUCANASAS, ENZIMAS HIDROLITICOS DE CARACTER ANTIFUNGICO. POR OTRO LADO SE HA AISLADO UN CLON DE CDNA CORRESPONDIENTE A UNA PROTEINA RICA EN LISINA Y TIROSINA UBICADA EN LA PARED CELULAR. SU ESTRUCTURA Y COMPORTAMIENTO SUGIEREN QUE ESTA PROTEINA, TLRP, PARTICIPA EN LAS MALFORMACIONES LA PLANTA ASOCIADAS A LAS ALTERACIONES DEL DESARROLLO PROVOCADAS POR EL VIROIDE.
  • ESTUDIOS QUIMICO-FISICOS CON ANTIBIOTICOS QUE INTERFIEREN EN LA SINTESIS DE LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS.
    Autor: ARRIAGA MARTITEGUI PALOMA.
    Año: 1989.
    Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: INSTITUTO DE QUIMICA-FISICA "ROCASOLANO" DEL C.S.I.C. .
    Resumen: ESTE ESTUDIO SE HA CENTRADO EN DOS TIPOS DE ANTIBIOTICOS QUE INTERFIEREN EN LA SINTESIS DE LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS A NIVEL DEL ENTRECRUZAMIENTO DE LAS CADENAS DE PEPTIDOGLICANO, IMPIDIENDO LA ACCION DE LAS TRANSPEPTICLASAS Y CARBOXIPEPTIDASAS: BETA-LACTAMICOS Y GLICOPEPTIDICOS. LOS ANTIBIOTICOS BETA-LACTAMICOS ACTUAN COMO ANALOGOS ESTRUCTURALES DE LA PARTE TERMINAL DEL PENTAPEPTIDO DEL PEPTIDOGLICANO. DENTRO DEL AMPLIO GRUPO DE BETA-LACTAMICOS HEMOS ELEGIDO TRES GRUPOS DE ANTIBIOTICOS QUE SE COMPORTAN CLASICAMENTE COMO INHIBIDORES EN LAS BETA-LACTAMICAS: DOS DE ELLOS SON REVERSIBLES (CEFAMICINAS Y MONOBACTAMICOS) Y EL OTRO ES IRREVERSIBLE (ACIDO CLAULANICO). ESTUDIAMOS SIN INTERACCION CON LAS BETA LACTANASAS I Y II DE BACILLUS CEREUS QUE SON SEGREGADAS POR EL MISMO ORGANISMO, PERO PERTENECEN A DOS GRUPOS CON MECANISMOS DE ACCION COMPLETAMENTE DIFERENTES. LOS ANTIBIOTICOS, GLICOPEPTIDICOS SE UNEN A LA PARTE TERMINAL DEL PENTAPEPTIDO BACTERIANO. EL GRUPO MAS CONOCIDO ES EL DE LA VAUCOMICINA QUE INCLUYE A LA NISTOATINA Y TEICOPLANINA. HEMOS REALIZADO UNA CARACTERIZACION TERMODINAMICA Y ESTRUCTURAL DE LA INTERACCION DE LA TERCOPLANINA CON DIVERSOS PEPTIDOS ANALOGOS EN LA PARTE FINAL DEL PENTAPEPTIDO BACTERIANO. ADEMAS HEMOS HECHO UN ESTUDIO COMPARATIVO CON EL RESTO DE LOS ANTIBIOTICOS DEL GRUPO Y CON EL AGLICON DE LA TEICOPLAMINA.
  • ESTUDIOS SOBRE EL CRECIMIENTO DE LA PARED CELULAR DE STREPTOMYCES.
    Autor: MIGUELEZ GONZALEZ ELISA M..
    Año: 1987.
    Universidad: OVIEDO.
    Centro de lectura: MEDICINA.
  • ESTRUCTURA DE LA PARED CELULAR DEL MICELIO VEGETATIVO DE AGARICUS BISPORUS.
    Autor: MARTINEZ COBO JULIO ALBERTO.
    Año: 1986.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS.
    Resumen: LAS ENVOLTURAS CELULARES FUNGICAS ENTRE LAS CUALES SE ENCUENTRAN LAS PAREDES CELULARES DE LOS BASIDIOMICETOS JUEGAN UN PAPEL RELEVANTE EN LOS DIFERENTES PROCESOS VITALES DE LA CELULA. EN ESTE TRABAJO SE HAN LLEVADO A CABO ESTUDIOS ESTRUCTURALES DE LAS PAREDES CELULARES DEL MICELIO VEGETATIVO DEL BASIDIOMICETO AGARICUS BISPORUS O CHAMPIÑON COMUN DE EXTRAORDINARIO INTERES ALIMENTARIO E INDUSTRIAL. ESTE ESTUDIO COMPLEMENTA EL CONOCIMIENTO DE LA ESTRUCTURA DE LA PARED CELULAR DE LOS BASIDIOMICETOS Y DE LOS HONGOS EN GENERAL POR CUANTO EL MODELO QUE SE ESTABLECE PUEDE INTERPOLARSE A OTRAS ESPECIES SIN ESTUDIAR. LAS PAREDES CELULARES DEL MICELIO VEGETATIVO DE A. BISPORUS CECT 2009 (ATCC 38258) OBTENIDAS CON UN ELEVADO GRADO DE PUREZA HAN MOSTRADO ESTAR COMPUESTAS PRINCIPALMENTE POR AZUCARES NEUTROS Y AMINADOS (MAS DEL 75% DEL PESO SECO), PROTEINAS Y LIPIDOS. MEDIANTE DIFERENTES TRATAMIENTO QUIMICOS SUAVES SE HA SOLUBILIZADO DE UNA MANERA MAS O MENOS SELECTIVA LA MAYOR PARTE DE LOS POLISACARIDOS NEUTROS DE LA PARED CELULAR QUEDANDO UN RESIDUO INSOLUBLE CONSTITUIDO PRINCIPALMENTE DE QUITINA. A PARTIR DE LOS EXTRACTOS ACUOSOS Y POTASICOS PROCEDENTES DE DICHAS PAREDES SE HAN AISLADO CINCO FRACCIONES SACARIDICAS QUE HAN SIDO DEBIDAMENTE PURIFICADAS Y CARACTERIZADAS: UN MUCILAGO B GLUCANO AMORFO MUY POCO LIGADO A LA SUPERFICIE DE LA PARED; DISPUESTO INMEDIATO AL ANTERIOR SE ENCUENTRA UN -GLUCANO FIBRILAR COMPONENTE ESQUELETICO DE LA PARED INTIMAMENTE LIGADO A UN B-GLUGANO CEMENTANTE ALTAMENTE RAMIFICADO. LAS DOS ULTIMAS FRACCIONES B GLUCANASICAS MUY SEMEJANTES AL B-GLUCANO ANTERIORMENTE CITADO SE DISPONEN SEGUIDAMENTE COMO MATERIAL QUE VA PAULATINAMENTE CEMENTANDO LAS MICROFIBRILLAS DE QUITINA INTRODUCIENDOSE HASTA LA PARTE MAS INTERNA DE LA PARED. DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS SE DEDUCE QUE LA ESTRUCTURA DE LA PARED CELULAR DEL MICELIO VEGETATIVO DE A. BISPORUS SE ADAPTA, CON LAS DIFERENCIAS PROPIAS DE SU PARTICULAR TAXONOMIA, AL MODELO GENERAL DE LOS BASIDIOMICETOS Y HONGOS SUPERIORES.
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