Cibernetia > Tesis doctorales
Búsqueda personalizada

Índice > CIENCIAS AGRARIAS > PRODUCCION ANIMAL >

REPRODUCCION ANIMAL



119 tesis en 6 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6
  • AVANCES DE LA TECNICA DE PRESELECCION DEL SEXO EN EL GANADO PORCINO MEDIANTE SEPARACION DE ESPERMATOZOIDES X E Y POR CITOMETRIA DE FLUJO .
    Autor: PARRILLA RIERA INMACULADA .
    Año: 2004.
    Universidad: MURCIA.
    Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: La separación espermática por citometría de flujo, es actualmente el único método eficaz para la obtención de descendencia de sexo deseado. Aunque se han realizado avances importantes en los últimos años en la especie porcina, es necesario un mayor conocimiento de diferentes aspectos relacionados con la eficiencia del proceso. El ajuste del citómetro de flujo resulta fundamental para optimizar los rendimientos del proceso. En la primera experiencia, se utilizaron espermatozoides de caprino ya que su proximidad filogenética con la especie ovina hacia esperar que presentaran unas diferencias en el contenido de ADN entre los espermatozoides X e Y próximas a las existentes en esta especie dando lugar a una fácil identificación de las poblaciones. La diferencia en la cantidad de ADN entre los espermatozoides X e Y de macho cabrio quedó establecida en un 4'4% permitiendo una clara diferenciación de las poblaciones X e Y. Los resultados obtenidos demuestran la utilidad de los espermatozoides de macho cabrio como instrumento para el ajuste de los equipos de separación espermática. Seguidamente, se procedió a diseñar un método para analizar la pureza de las poblaciones espermáticas separadas como sistema para la evaluación de la eficacia del procedimiento. En la realización de esta segunda experiencia se fabricaron sondas de ADN directas, especificas para cromosomas 1 e Y porcinos, construidas mediante PCR y posterior marcaje fluorescente por el método de desplazamiento de cortes. La eficiencia de hibridación fue del 98 %. Además, la utilización de este sistema de marcaje dio lugar a sondas que originaban marcas fluorescentes muy claras, utilizándose para la evaluación de las purezas obtenidas en poblaciones espermáticas X e Y separadas. Las purezas más altas (entre un 92'5 y un 89'5 %) se obtuvieron utilizando criterios de selección estrictos, confirmando la eficacia del citómetro utilizado y evidenciando la estrecha relación existente entre la pureza de una muestra espermática separada y el rendimiento del proceso. Los espermatozoides separados presentan una serie de cambios en su motilidad, viabilidad e integridad acrosomal similares a los experimentados durante el proceso de capacitación, comprometiendo la estabilidad de sus membranas y afectando a la viabilidad y a la capacidad fecundante de los mismos. Teniendo en cuenta que los rendimientos de los equipos actuales, cuando se trata de espermatozoides de verraco, implican periodos de separación de hasta 10 h, conocer la influencia del tiempo de conservación sobre la viabilidad y capacidad fecundante de estos espermatozoides, es fundamental para la determinación del tiempo máximo de conservación. Más aún, los laboratorios de separación suelen estar lejos del lugar de inseminación, por lo que el tiempo que transcurre en el transporte de los espermatozoides debe ser evaluado. Por tanto, es necesario analizar el estado de la población espermática en función del tiempo de conservación al que es sometida. Para ello, en una tercera experiencia se analizaron la motilidad, viabilidad, estado acrosomal y capacidad de penetración de espermatozoides de verraco separados y almacenados tras la separación durante 0, 2, 5 y 10 h. El análisis de estos parámetros determinó que, la capacidad de penetración de estos espermatozoides empieza a decrecer 5 h tras la separación. También se evidenció que un tiempo de almacenamiento de 2 h aumentaba la capacidad fecundante de los espermatozoides separados respecto a los espermatozoides recién recogidos. En la cuarta experiencia se procedió al estudio de la fertilidad in vivo de los espermatozoides de verraco separados y a la determinación de las condiciones más adecuadas para la obtención de las mejores tasas de fertilidad posibles. Los espermatozoides separados fueron inseminados mediante inseminación intrauterina profunda (DUI). Las tasas de fertilidad obtenidas demostraron que la DUI puede ser utilizada para la obtención de descendencia viva a partir de espermatozoides separados. Finalmente, se evaluó el posible efecto genotóxico que el proceso de separación espermática por citometría de flujo podría tener sobre los espermatozoides de verraco. Primero, se evaluó el efecto individual del fluorocromo Hoechst 33342 sobre la célula espermática, y en segundo lugar el efecto adicional del impacto del láser UV sobre los espermatozoides teñidos con Hoechst 33342. Los resultados obtenidos tanto para los parámetros reproductivos, como para los análisis fenotípicos y genotípicos de la descendencia nacida confirmaron la ausencia de un efecto perjudicial de la separación espermática por citometría de flujo sobre el ADN de los espermatozoides de verraco.
  • RECUPERACION DE LA FERTILIDAD Y PROLIFICIDAD DEL SEMEN PORCINO CONSERVADO EN REFRIGERACION MEDIANTE ADITIVOS SEMINALES .
    Autor: ROMAN GRANDE M. TERESA.
    Año: 2003.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA. UNIVERSIDAD DE LEON.
    Resumen: El objetivo de este trabajo fue estudiar si la adición de aditivos seminales (LECHON-PLUS) a las dosis seminales conservadas en refrigeración durante 24 y 48 horas, justo antes de realizar la inseminación artificial en las explotaciones porcinas, recuperaban la fertilidad y la prolificidad. Se definieron cuatro grupos experimentales (grupo 1: cerdas control inseminadas sin añadir aditivos al semen almacenado durante 24 horas, grupo 2: cerdas control inseminadas sin añadir aditivos al semen almacenado durante 48 horas, grupo 3: hembras en que previamente a la inseminación se añadía 1 ml de aditivo al semen almadenado durante 24 horas y grupo 4: hembras en que previamente a la inseminación se añadía 1 ml de aditivo al semen almacenado durante 48 horas). El estudio se realizó en siete explotaciones comerciales de ganado porcino situadas en las provincias de León, Palencia, Segovia y Valladolid. Se inseminaron 2715 cerdas, de las cuales 43 eran cerdas nulíparas y 2672 cerdas multípars. Las dosis de inseminación utilizadas procedíasn de los Centros de Inseminación Artificial Porcinos de Aldea Real (SEGOVIA) y de NUTRIBAL en Cerviá de las Garrigas (LÉRIDA). En el aditivo (LECHON-PLUS) hay tres tipos de constituyentes: 5UI de Oxitocina, 10ug-17B estradiol y excipiente para mejorar la motilidad espermática (cafeína). La aplicación de LECHON-PLUS consistió en añadir a las dosis seminales de 100 ml, 1 ml de aditivo, realizando a continuación un ligero volteo del envase de la dosis para un correcto homogeneizado y en el momento previo a la inseminación de la cerda en celo (reflejo de inmovilidad). Además de la fertilidad y la prolificidad, se tuvieron en cuenta, el número de lechones nacidos vivos y el número de lechones nacidos muertos. Hubo difernencias estadísticamente significativas (p0,05) en la variable fertilidad para el semen conservado durante 48 horas. En cambio, hubo diferencias estadísticamente significativas (p0,05) en prolificidad. La aplicación de aditivos a ls dosis aumentó el número
  • SELECCION DE ESPERMATOZOIDES OVINOS DE ALTA CALIDAD Y CAPACIDAD FECUNDANTE. ESTUDIO DE LOS MECANISMOS MOLECULARES DE LA CAPACITACION .
    Autor: GRASA MOLINA ANA PATRICIA.
    Año: 2003.
    Universidad: ZARAGOZA.
    Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: La capacidad fecundante de un eyaculado reside en subpoblaciones espermáticas concretas que mantengan las características de integridad y viabilidad necesarias para consumar el proceso de fecundación, que incluye los procesos de capacitación y reacción acrosómica. En este trabajo se analizó la posible correlación entre las características de las diferentes subpoblaciones de una dosis seminal (obtenidas mediante CCCD) y la capacidad fecundante de la misma dosis mediante inseminación intrauterina. Además, este trabajo ha permitido establecer una correlación positiva entre los valores de heterogeneidad y viabilidad recuperada tras un proceso de CCCD con la fertilidad obtenida, deduciendo una ecuación de predicción de la capacidad fecundante de una dosis seminal con un coeficiente de correlación r = 0,967 y alta significación (P menor que 0,005). Estos resultados indican la importancia de las características que determinan el reparto de espermatozoides en CCCD. Por ello, se trató de dilucidar la influencia que ejercen los diferentes estados fisiológicos y los cambios debidos al manejo y conservación del semen sobre la distribución subpoblacional por CCCD. Los resultados obtenidos han permitido comprobar la semejanza entre los efectos dela refrigeración y la congelación con los procesos de capacitación y reacción acrosómica, respectivamente. Estos datos asignan todavía mayor valor a estos procesos ya que la baja fertilidad de una dosis congelada no sólo puede deberse a un bajo nivel de supervivencia espermática, sino que también puede influir el hecho de quela mayoría de los espermatozoides estén prematuramente capacitados, es decir, preparados para fecundar al ovocito cuando aún se encuenran muy lejos de él. Por ello, en este trabajo se ha pretendido ahondar en el conocimiento de los mecanismos moleculares de la capacitación, analizando las rutas de transducción de señal ligadas a los procesos de fosforilación de proteínas, demostrando, por primera vez, la implicación de la fosforilación de proteínas en tirosina, serina y treonina en el proceso de capacitación ovino. Se ha establecido el patrón de fosforilación en espermatozoides ovinos y la localización en los diferentes dominios celulares de fosfo -tirosinas, serinas y treoninas, analizando los cambios inducidos por los procesos de capacitación y reacción acrosómica.
  • ESTUDIO DEL EFECTO DE LA CONGELACIÓN-DESCONGELACIÓN SOBRE LOS PARÁMETROS MORFOMÉTRICOS DEL ESPERMATOZOIDE DE MACHO CABRÍO .
    Autor: HIDALGO PRIETO MANUEL.
    Año: 2003.
    Universidad: CORDOBA.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: El objetivo presente trabajo ha sido estudiar el efecto de la congelación-descongelación sobre los parámetros morfométricos de la cabeza del espermatozoide de macho cabrío, sleccionando para ello el método de análisis idóneo en esta especie, además de valorar la influencia de la estación y factores climáticos sobre los parámetros morfométricos. Para ello, empleando el Sperm Class Analyzer (SCA®), sobre un total de 16 eyaculados repartidos equitativamente entre 4 machos, se valoró la influencia de las tinciones Diff-Quik (DQ), Hemacolor (HC) y Hematoxilina de Harris (HH) en la eficacia del análisis de imagen y valores medios de los parámetros morfométricos de tamaño (longitud, anchura, área y perímetro) y forma de la cabeza (Elipticidad), estableciendo el número de necesario de células a analizar por preparación. Sobre 76 eyaculados de 2 machos, se valoró el efecto de la congelación-descongelación sobre los parámetros morfométricos empleando dos diluyentes (Tris y Lácteo) y estudiando, antes de congelar, la influencia de la estación y factores climáticos sobre los parámetros morfométricos. De forma complementaria al análisis morfométrico, en todas las muestras de esperma utilizadas se valoraron los parámetros seminales volumen, concentración, movimiento total y rápido progresivo, morfología y acrosoma. Para valorar la respuesta a la congelación-descongelación de los parámetros morfométricos en función de la congelabilidad de los eyaculados, se fijaron dos criterios de selección, uno a la precongelación de acuerdo a los parámetros evaluados, y otro a la descongelación en base a la respuesta de las dosis al test de la longevidad del movimiento progresivo. El análisis de un mínimo de 100 espermatozoides por preparación empleando la tinción DQ, resultó ser el método más eficaz para valorar con el SCA los parámetros morfométricos del espermatozoide. La estación del año influyó significativamente sobre los parámetros morfométricos, aumentado el tamaño de la cabeza y disminuyendo su elipticidad durante el otoño, lo que coincidió con los mayores porcentajes de movimiento rápido progresivo y formas normales. La temperatura ambiental provocó una reducción del tamaño de la cabeza y aumento de su elipticidad durante los periodos más calurosos. Aunqeu la influencia de esta sobre el movimiento, formas normales e integridad del acrosoma no fue significativa, observamos un descenso de sus valores cuándo las temperaturas fueron más elevadas. La congelación-descongelación afecto a todos los parámetros morfométricos evaluados, con una reducción en el tamaño de la cabeza y un aumento de su elipticidad, acompañado de un descenso en los valores de movimiento e integridad del acrosoma a la descongelación. Se observaron diferencias significativas entre diluyentes, con una mayor reducción del tamaño de la cabeza tras la congelación-descongelación en el caso del Tris. El número de parámetros morfométricos de la cabeza del espermatozoide afectados por el proceso de congelación-descongelación, fue menor en aquellos eyaculados que cumplieron los requisitos exigidos a la precongelación cuando se empleó el diluyente Lácteo. El número de parámetros morfométricos de la cabeza del espermatozoide afectados por el proceso de congelación-descongelación, fue menor en las dosis que cumplieron el test de longevidad del movimiento.
  • LA METRITIS EN LA VACA: ETIOLOGÍA, TRATAMIENTO E IMPLICACIONES EN LA REPRODUCCIÓN .
    Autor: GARCÍA RODRÍGUEZ MANUEL ERNESTO.
    Año: 2003.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: La presente tesis doctoral está basada en la realización de una serie de trabajos sobre la etiología y los efectos de la metritis sobre la reproducción en establos de la provincia de Lugo. En fin del mismo era obtener un conocimiento profundo de algunos aspectos de esta patología uterina que pudiera ser de utilidad para los veterinarios clínicos, que realizan su trabajo, en esta provincia, por eso el primer trabajo incluido fue una encuesta a los veterinarios respecto a la situación actual de las metritis desde su punto de vista. El resto de los trabajos van orientados a diferentes aspectos de esta patología: Trabajo 1: La metritis es una de las patologías más frecuentes en el postparto en el ganado vacuno, provocando, en general, un efecto negativo sobre la eficacia reproductiva de los rebaños. El objetivo de este trabajo fue cuantificar el posible efecto negativo de las metritis sobre los parámetros reproductivos (parto-primer celo, parto-primera inseminación, parto-inseminación fecundante y número de inseminaciones (IA)/gestación) en explotaciones del noroeste de España (Galicia). Se utilizaron los registros reproductivos de 1823 partos de 729 vacas de leche pertenecientes a 106 explotaciones. Los datos fueron recogidos de los registros existentes en las explotaciones, elaborados por los veterinarios encargados de realizar el control reproductivo, y en algunos casos, por los propios ganaderos. Los animales que presentaron alguna patología postparto diferente a las metritis fueron eliminados del estudio. El efecto de la metritis postparto sobre los parámetros reproductivos fue evaluado mediante un Modelo Lineal General (GLM). Los resultados demostraron un efecto negativo, significativo, de la metritis postparto sobre el intervalo parto-primera inseminación, intervalo parto-inseminación fecundante y sobre el número de IA/gestación, incrementándose en 18.3 días, 46.1 días y 0.6 inseminaciones respectivamente. Trabajo 2: La duración de la involución uterina se alargó en vacas viejas, en animales que presenten alteraciones postparto (retención de planceta, metritis, etc.), en partos gemerales o cuando estos ocurren durante el invierno. Otro factor que puede influir en la involución uterina es el estatus metabólico de los animales durante el postparto pudiéndose conocer mediante el estudio de diferentes parámetros séricos. El objetivo de este estudio fue determinar si las variaciones de alguno de estos parámetros séricos durante el postparto estaban relacionadas con la duración de la involución uterina. Se utilizaron 80 vacas de producción láctea (Holstein Friesian y Fleckvieh), a las que se sometió a exploraciones rectales emanales desde la segunda semana hasta que el útero estaba completamente involucionado. Al mismo tiempo, se les extrajo una muestra de sangre semanalmente desde la primera a la quinta semana postparto y una última muestran en la séptima semana. En cada una de ellas se han determinado un grupo de parámetros séricos. La relación entre estos y la involución uterina fue investigada mediante un análisis de regresión lineal múltiple. Los resultados obtenidos mostraron que la duración media de la involución uterina fue de 25.56 días. El análisis de regresión lineal múltiple extrajo tan solo un pequeño número de variables en todas las semandas estudiadas (colestero, raza y número de partos). Trabajo 3: Se estudiaron los factores de riesgo asociados al pacedimiento de la metritis, entendida ésta como la infección uterina acompañada de se creción mucopurulenta, en 1721 animales pertenecientes a 357 establos ubicados en el Noroeste de España (Galicia). Los datos utilizados para la realización de este estudio procedieron de los registros de la explotación recogidos por los veterinarios encargados de la reproducción o por los propios ganaderos. Los potenciales factores de riesgo incluidos fueron: la estación de parto, la dificultad de parto, la aptitud productiva, la retención de placenta, la cetosis, la fiebre vitular, el aborto, la neumovagina, el parto gemelar, el número de parto, el tamaño de la explotación y la duración de la gestión. La incidencia media de la metritis fue 6.9%. Una vez realizado el Análisis de Regresión Logística Múltiple se observó que el riesgo de padecer metritis se incrementó en aquellos animales que padecieron distocia (OR=2.20, P nenor 0.01) aborto (OR=2.41, P menor 0.01) o retención de placenta (OR= 3.10, P menor 0.01) o cuando aumento el tamaño de explotación (OR=1.10, p menor 0.01). Además el riesgo disminuyo en las vacas de carne (OR=0.31, P menor 0.01) o cuando el número de partos se incrementó (OR=0.93, P menor 0.01). Trabajo 4: Se recogieron muestras de fluido uterino de 52 vacas de raza Holstein-Friesian, con metritis postparto, de la provincia de Lugo. Las muestras fueron trasnportadas en refrigeración hasta el Laboratorio de Ganadería de Lugo donde se realizó el aislamiento, identificación y antibiograma. Se recogieron así mismo los datos reproductivos correspondientes a cada uno de los animales. Los microorganismos aislados con mayor frecuencia en las muestras fueron Arcanobacterium pyogenes (48.1%) y E.coli (30,8%). La metritis agudas y crónicas han superado el 83%, repartidas en igual porcentaje, mientras que la subagudas han sido el 12.2%, El 56.3% de la metritis producidas por E.coli fuerona gudas y el 47.8% de las producidas por Arcanobacterium pyogenes fueron crónicas. Las sensibilidad "inv itro" reveló que las cefalosporinas son los antibióticos de elección frente a las infecciones provocadas por losmicroorganismos descritos, obteniendo un 100% de sensibilidad para E.coli y un 92% para Arcanobacterium pyogenes. Los parámetros reproductivos de los animales con metritis provocadas por E.coli, Arcanobacterium pyogenes y del total de los animales en control lechero de la provincia de Lugo fueron: intervalo parto-celo: 88.5, 111.6 y 85.0 días respectivamente. Intervalo parto-gestación: 129.5, 176.0 y 141.0 días respectivamente y el número de inseminaciones/gestación: 1,7, 2,5 y 1,9 inseminaciones/gestación respectivamente.
  • Dedifferentiation of rabbit adult fibroblast nuclei by nuclear transfer and chimaerism: an animal model to obtaining human embryonic stem cells.
    Autor: CERVERA JUANES RITA PILAR .
    Año: 2003.
    Universidad: POLITECNICA DE VALENCIA.
    Centro de lectura: Dep. Ciencia Animal.
    Centro de realización: Universidad Politécnica de Valencia.
    Resumen: El objetivo del presente trabajo pretende desarrollar dos técnicas, la transferencia nuclear de células somáticas y el quimerismo, para desdiferenciar células somáticas derivadas de individuos de edad muy avanzada. Para ello se ha utilizado el conejo como modelo animal para la clonación terapéutica en humanos. Durante los sucesivos experimentos realizados en el presente trabajo, las etapas técnicas de la transferencia nuclear y las condiciones de trabajo se fueron definiendo y mejorando progresivamente. Un claro ejemplo de esta evolución técnica queda reflejado en la definición de los tratamientos de fusión y activación. Durante la realización de estos experimentos, los aspectos biológicos relativos a la transferencia nuclear de células somáticas fueron también estudiados. Cuando se utilizaron fibroblastos de individuos de avanzada edad, no se observaron diferencias en la tasa de blastocistos (30-ADF 21% vs 60-ADF 19% vs 90-ADF 18%). Las diferencias detectadas en la tasa de blastocistos escapados no alcanzaron niveles de significación (30-ADF 11% vs 60-ADF 18% vs 90-ADF 18%). Sin embargo, en los grupos 60- y 90-ADF, los embriones alcanzaron el estadio de blastocisto más pronto que en el grupo de 30-ADF (día 4: 40% y 50% vs 8%, p>0.05). Además, la calidad de los blastocistos fue inferior en el grupo 30-ADF (buena: 30-ADF 38% vs 60-ADF 90% vs 90-ADF 90%, p>0.05). Para evaluar la hipotética capacidad de desdiferenciación de embriones en estadios tempranos del desarrollo sobre fibroblastos de individuos muy envejecidos, así como el posible efecto de auxilio celular ejercido por parte de estos fibroblastos sobre los embriones reconstituidos, se realizaron una serie de experimentos de quimerismo. Puede concluirse de estos experimentos, que la inserción de fibroblastos no supone daño alguno sobre los embriones, y que el estadio embrionario de 4-8 células es el más adecuado para realizar el quimerismo, puesto que permite la inserción de los fibroblastos en una posición central.
  • EFECTO DE DIFERENTES SISTEMAS DE REPRODUCCIÓN SOBRE EL DESARROLLO PRODUCTIVO DE CABRAS EN EL NE DE BRASIL, UTILIZANDO INSEMINACIÓN ARTIFICIAL Y MONTA NATURAL .
    Autor: FELIX DE SOUSA PEDRO HUMBERTO.
    Año: 2003.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: El presente trabajo comprende el estudio del efecto de diferentes sistemas de reproducción (SR); un parto al año y tres partos en dos años de distintos tipos de cubrición (TC): inseminación artificial (IA) y cubrición natural controlada (CNC) y de los factores de variación SR/TC y el orden de parto sobre el comportamiento productivo de cabras del tipo sin raza definida. Fueron utilizdas 62 cabras y 2 recelas SRSD y 2 sementales y semen congelado del a raza anglonubiana. Para conseguir los objetivos, las cabras fueron distribuidas en 4 grupos siendo el 1º un parto al año con CNC, formado por 14 cabras. 2º un parto al año con I, formado por 14 cabras. 3º tres partos en dos años con CNC, formado por 17 cabras y el grupo 4º tres partos en dos años con uso de IA, formado por 17 cabras del grupo 1º y 2º fueron sometidas a dos estaciones de reproduccion, una en cada año, mientras que las cabras de los grupos 3º y 4º fueron sometidas a tres estaciones de reproducción obedeciendo a un intervalo entre partos de 8 meses. Todas las cabras fueron pesadas a la cubrición, al parto y al destete. El acompañamiento del desarrollo ponderal de las crias fue hecho a através de pesadas efectuadas al nacer y al destete. Para el control de la manifestación de estro se utilizó recelas. Las cabras observadas en estro por la mañana eran cubiertas con el semental o insumidas por la tarde, mientras que aquellas observadas en estro por la tarde fueron cubiertas con el semental o inseminadas en la mañana del día siguiente. La fertilidad al parto teniendo en cuenta las cabras expuestas y/o cubiertas fue semejante (P mayor 0,05). No obstante, la interacción SR/TC evidneció haber diferencia estadística significativa (p menor 0,05) favorable para las cabras expuestas al SR de un parto al año con CNC (75%). Con relación a los sistemas de un parto al año con IA (37%) y de tres partos en dos años con CNC (50%) y/o (54%). La prolificidad no fue influenciada estadísticamente (p mayor 0,05) por ninguno de los factores de variación. El peso de la cabra a la cubrición fue superior (P menor 0,05) en las cabras sometidas a la inseminación artificial (36,05 kg) que en las cabras de CNC (33,54 kg). El SR aisladamente sólo influyó significativamente (P menor 0,05) en el peso al parto, siendo los valores de 44,41 y 35,97 kg para las cabras sometidas al sistema de un parto al año y de tres partos en dos años, respectivamente. El orden de partos influyó en el peso a la cubrición, al parto y al destete, siendo las cabras de 2º o más partos, considerando estadísticamente superior (P menor 0,05), con relación las cabras de 1º parto. La mortalidad de cabras fue estadísticamente semejante en el estudio, de los factores de variación. El peso de las crías al nacer y al destete fue estadísticamente diferente (P menor 0,05). En el grupo obtenido al partir de cabras cubiertas artificialmente con relación a las crías nacidas de cabras cubiertas naturalmente. El tipo de parto influyó estadísticamente (P menor 0,05) en el peso al nacer y al destete siendo las crías obtenidas de parto simple más pesadas (P menor 0,05) que las crias nacidas de partos dobles. El peso al destete fue estadísticamente superior (P menor 0,05) para los machos. El peso de crías destetadas/cabra expuesta fue estadísticamente mayor (P mayor 0,05) en el grupo de un parto al año con uso de CNC (11,6 kg) con relación a los grupos de un parto al año con uso de inseminación artificial (5,3 kg) y de tres partos en dos años con CNC (7,1 kg) y/o con IA (7,7kg).
  • EVALUACIÓN DE DIFERENTES DILUYENTES EN LA CONGELACIÓN DEL SEMEN CAPRINO .
    Autor: CLEMENTE DE MELLO SALGUEIRO CRISTIANE.
    Año: 2003.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: EXPERIENCIA 1. EFECTO DE DIFERENTES DILUYENTES Y MÉTODOS DE CONGELACIÓN SOBRE LA VIABILIDAD DEL SEMEN DE MACHOS CABRÍOS. En esa experiencia, testamos la viabilidad del semen de machos cabríos de la raza Murciano-Granadina a través del uso de diferentes diluyentes y métodos de congelación. Los diluyentes utilizados fueron: AC (agua de coco in natura congelada + citrato sódico + yema + glicerol), y (TRIS + glucosa + glicina + cisteína + yema + glicerol) y TC (TRIS + ácido cítrico + fructosa + yema + glicerol) y los métodos de congelación: 1,- En cinco fases de dilución. 2,- En dos fases de dilución. 3,- En cuatro fases de dilución. Utilizamos diez eyaculados procedentes de dos machos cabríos que fueron contrastados en cuanto al volumen (ml) y a la concentración (x10 9 sptz/ml). Tras esas primeras contrastaciones, los eyaculados fueron mezclados y evaluados respecto a: motilidad en masa (MM) (0-5); porcentaje de células móviles (PCM); calidad de movimiento (CM) (0-5); porcentaje de acrosomas normales (AN); porcentaje de endósmosis positiva (EP); y porcentaje de células morfológicamente normales (CMN). Tras 15 días de la congelación, cuatro pajuelas de cada tratamiento (diluyente x método de congelación) fueron descongeladas a 37ºC para la realización de la prueba de resistencia (PR) que se procesó a los 5, 30, 60, 90 y 120 minutos de incubación a través de la evaluación del PCM y de la CM. Se evaluó, también, AN, EP y CMN a los 5 y 120 minutos de incubación, se evaluó asimismo la tasa de degradación de la motilidad (TDM). En todos los tiempos de incubación observados, el tratamiento que mostró mejores resultados de PCM y CM fue Y3, mientras que el tratamiento AC3 presentó tendencia a los peores resultados (p menor 0,05). En cuanto a la degradación de la motilidad, observamos que el diluyente que mejor protegió a la motilidad celular fue el TC, independientemente del método de congelación utilizado. EXPERIENCIA 2. EVALUACIÓN DE LA CALIDAD IN VITRO DEL SEMEN CONGELADO DE MACHOS CABRÍOS DILUIDO EN ACIN O EN TRIS. En esta experiencia, testamos dos diluyentes de congelación del semen de machos cabríos. Los diluyentes utilizados fueron: ACIN (agua de coco in natura de frutos recién colectados + citrato sódico + yema + glicerol) y TRIS (TRIS + ácido cítrico + fructosa + yema + glicerol). Utilizamos doce eyaculados procedentes de tres machos cabríos de la raza Murciano-Granadina que fueron contrastados cuanto a los siguientes parámetros: volumen (ml); concentración (x10 9 sptz/ml); motilidad en masa (MM) (0-5); porcentaje de células móviles (PCM); calidad de movimiento (CM) (0-5); porcentaje de acrosomas normales (AN); procentaje de endósmosis positiva (EP); y porcentaje de células morfológicamente normales (CMN). Fueron congeladas 288 dosis de semen en total, sendo 144 de ellas descongeladas y contrastadas y las demás fueron utilizadas en inseminaciones artificiales. Tras 15 días de la congelación, dos pajuelas de cada tratamiento fueron descongeladas e incubadas a 37ºC para la realización de la prueba de resistencia (PR) que se procesó a los 5, 30, 60, 90 y 120 minutos de incubación a través de la evaluación del PCM y de la CM. Se evaluó también AN, EP y CMN a los 5 y 120 minutos de incubación y la tasa de degradación de la motilidad (TDM). En todos los tiempos de incubación observados, el diluyente ACIN mostró mejores resultados de PCM (p menor 0,05) y de CM (p menor 0,001). Sin embargo, la TDM no fue influenciada por el tipo de diluyente utilizado en la congelación del semen (p mayor 0,05). No hubo diferencias significativas (p mayor 0,05) respecto a AN,EP y CMN. EXPERIENCIA 3. EVALUACIÓN DE LA FERTILIDAD A CABRAS INSEMINADAS CON SEMEN CONGELADO DE MACHOS CABRÍOS DILUIDO EN ACIN O EN TRIS. En esta experiencia, testamos la viabilidad in vivo del semen congelado de machos cabríos diluido en ACIN (agua de coco in natura de frutos recién colectados + citrato sódico + gema + glicerol) o en TRIS (TRIS + ácido cítrico + fructosa + yema + glicerol) a través de inseminaciones artificales. Utilizamos 129 cabras con edad media de 40,70 +- 18,5 meses y condición corporal media de 2,59 +- 0,23. El resto de las cabras fue sincronizado a través de esponjas vaginales impregnadas con 50 mg de acetato de medroxiprogesterona (MAP), que permaneció en la porción craneal de la vagina por 11 días y por la inyección intramuscular de 200 U.I., de gonadotropina coriónica equina (e.C.G) y 50 ug de PGF 2-alfa, ambas administradas 48 horas antes de la retirada de las esponjas. Las inseminaciones artificiales (I.A.) fueron realizadas 40 a 44 horas tras la retirada de las esponjas, utilizando semen congelado de machos cabríos de la raza Murciano-Granadina diluido en ACIN o en TRIS. Las dosis de inseminación se eligieron de forma aleatoria, 65 cabras fueron inseminadas con ACIN y 64 con TRIS. En cuanto al lugar de deposición del semen, 45,74% de las I.A., fueron realizadas intrauterinamente (IU), 34,11% intracervical profunda (CP) y 20,15%, cervical rasa (CR), o sea, en la entrada de la cervix. Verificamos una fertilidad de 47,69% con ACIn y 40,63% en TRIS (p menor 0,05); una prolificidad de 1,80 en ACIN y de 1,77 en TRIS (p mayor 0,05). El macho cabrío utilizado no afectó ni la fertilidad ni la prolificidad ni el sexo de la cria nacida (p mayor 0,05), presentando los tres un nivel de fertilidad superior (p menor 0,05) cuando su semen era congelado en ACIN. El tipo de diluyente afecto de forma significativa (p menor 0,01) el sexo de las crías nacidas. El lugar de deposición del semen no afecto al nivel de fertilidad alcanzado. No encontramos diferencias significativas en los niveles de fertilidad alcanzados por los inseminadores, independientemente del diluyente utilizado y del lugar de deposición del semen.
  • EVALUACIÓN Y CONSERVACIÓN DEL SEMEN EN EL ASNO ZAMORANO-LEONÉS .
    Autor: SERRES DALMAU CONSUELO.
    Año: 2003.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: Hemos realizado este estudio con el fin de determinar los parámetros normales del semen del burro zamorano-leonés: optimizar la metodología de refrigeración de semen y desarrollar un sistema de ciroconservación del semen de burro de esta raza. Para ello hemos realizado tres experiencias independientes. En una primera experiencia evaluamos las características seminales de 38 eyaculados obtenidos de 7 burros zamorano-leoneses para establecer los parámetros de normalidad dentro de la raza. Los varones seminales encontrados en la raza Zamorano-Leonesa son similares al os descritos en otras razas de asnos; presentando gran homogeneidad en los parámetros relacionados con la calidad del semen (pH, MT, MP, A, HOS), pero una gran variabilidad en cuanto a la producción (Vo, NT, NTMP y NTMPN). En una segunda experiencia realizamos un estudio sobre refrigeración del semen de asno con el fin de establecer las condiciones de recogida y manipulación que permitan la máxima supervivencia de los espermatozoides de asno para su almacenamiento. Evaluamos el "efecto del plasma seminal" mediante el estudio de la recogida de semen con vagina cerrada y la posterior eliminación o no del plasma seminal y la recogida de semen con vagina abierta; el "efecto del diluyente", comparando el uso de Leche, Kenney, INRA 82 o TRIS-yema; y el "efecto de la temperatura de conservación" utilizando tres temperaturas 20ºC, 15ºC y 4ºC. En esta experiencia encontramos que el plasma seminal tiene un efecto negativo en la viabilidad del semen refrigerado del burro, que el uso del diluyente INRA 82 para la refrigeración de semen en ausencia de plasma seminal puede mantener su viabilidad por un periodo amplio de tiempo, superior a las 60 horas y finalmente el método de conservación de semen a 15ºC en condiciones aeróbias conservó mejor la integridad de la membrana plasmática. En una tercera experiencia intentamos establecer una técnica de crioconservación de semen de asno que permita obtener la máxima calidad del semen de asno tras su descongelación. Con este fin evaluamos el "efecto del diluyente" usando BURNS y SMEY; y el "efecto del tipo y concentración de crioprotector" usando dos crioprotectores: etiliengicol y glicerol, cada uno de ellos a dos concentraciones distintas 2.5% y 5%. Observamos que el glicerol es mejor crioprotector en la congelación de semen de burro zamorano-leonés que el etilenglicol; la concentración de 2.5% de crioprotector independientemente del diluyente y del tipo de crioprotector ha sido más efectiva que el 5% ; y que la congelación de semen de asno zamorano-leonés con SMEY 2.5% GLICEROL, permite obtener las mejores características postdescongelación para ser utilizado en la inseminación artificial.
  • RELACIÓN ENTRE LOS MÉTODOS DE VALORACIÓN SEMINAL IN VITRO Y LA FERTILIDAD IN VIVO DEL SEMEN DESCONGELADO DE TOROS FRISONES .
    Autor: MADRID BURY NINOSKA.
    Año: 2003.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: El objetivo de esta tesis fue estudiar los métodos de evaluación in vitro de las características seminales para la predicción de la fertilidad de sementales bovinos. Se utilizó semen descongelado de 5 toros Frisones, entre 2 y 3 años, con tasas de no retorno (TNR) a los 90 días entre 60 y 81%. Tres toros tenían TNR alta (75-81%) y 2 la tenían baja (60-61%). Se evaluaron 6 eyaculados/toro. Se realizan 4 experimentos, utilizando pruebas convencionales y complementarias de funcionalidad espermática, como: concentración, movilidad, vitalidad, morfología, integridad de las membranas plasmáticas y acrosomal, penetración de los ovocitos, división y desarrollo de los embriones, in vitro. Además se determinó la condensación y la estabilidad de la cromatina de los epsermatozoides. Los resultados de cada variable se correlacionaron con la TNR de los toros, a la vez que se determinó la correlación entre variables. No se observaron diferencias entre los eyaculados de un mismo toro para todas las variables ni en la TNR por eyaculado y toro. El porcentaje de espermatozoides normales fue superior en los toros con alta TNR (p menor 0,01) y estuvo correlacionado con la fertilidad in vivo (r=60; p menor 0,01). El porcentaje de ovocitos penetrados por los espermatozoides de los toros con alta TNR fue superior (91 vs 85%; p menor 0,05), al igual que la concentración de espermatozoides seleccionados por swim-up (5,0 vs 4,3 x 10 6/ml). La fertilidad de los toros se correlacionó con la penetración (r=0,45; p menor 0,001) y con la concentración de espermatozoides seleccionados por swim-up (r=0,26; p menor 0,05). Se observó correlación entre el porcentaje de espermatozoides normales con la penetración y con la concentración swim-up (r=25; p menor 0,01 y r=0,27; p mayor 0,05). Los toros con alta TNR mostraron mayor división de embriones (90 vs 84,8%; p menor 0,05); sin embargo, no hubieron diferencias entre los toros en la producción de blastocistos y en el desarrollo de los embriones a los 7, 8 y 9 días post-inseminación. Existió correlación entre la división de embriones y la TNR (r=0,55; p menor 0,001) y entre la penetración y la división de embriones (r=0,49; p menor 0,05). La valoración de la condensación y la estabilidad de la cromatina se realizó mediante citometría de flujo empleando el yoduro de propidio para teñir al ADN; la estabilidad de la cromatina se valoró mediante el método de Huret (1983) modificado para evaluar los espermatozoides de toro. La concentración EDTA+SDS de 12,5% permitió una mejor valoración de la estabilidad de la cromatina. No se observó correlación entre la condencasión de la cromatina y la fertilidad de los toros. La estabilidad de la cromatina fue mayor (p menor 0,05) en los toros con alta fertilidad; 183, 186, 188 vs 215 y 221 UIFM (unidades de intensidad media de fluorescencia) y estuvo correlacionada con la TNR (r=0,66; p menor 0,001). Se observó correlación entre el porcentaje de embriones divididos y la estabilidad de la cromatina (r=0,46; p menor 0,01). La utilización de los parametros que explicaban el 82% de la variabilidad de la fertilidad in vivo de los toros como la estabilidad de la cromatina (36%), el porcentaje de espermatozoides normales (25,2%), el porcentaje de embriones divividos (16,8%) y el porcentaje de ovocitos penetrados (3,6%) permitió elaborar una ecuación de predicción.
  • ESTUDIO SOBRE LA DINÁMICA DE POBLACIONES ESPERMÁTICAS EN SEMEN DE CABALLO, CERDO Y CONEJO .
    Autor: QUINTERO MORENO ARMANDO ARTURO.
    Año: 2003.
    Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
    Centro de lectura: VETERINARIA .
    Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.
    Resumen: El primer objetivo de este estudio fue determinar la presencia de subpoblaciones espermáticas con pautas específicas de motilidad en semen de caballo, cerdo y conejo. Se utilizó para este fin el análisis computarizado de la motilidad espermática (CASA). La optimización de las variables que mejor explican el movimiento espermático se realizó mediante un análisis de agrupamiento de variables basado en el estudio de su matriz de covarianza. La investigación demostró que tres subpoblaciones espermáticas en semen de cerdos y cuatro en semen de caballo y conejo coexiste en los eyaculados. Se econtraron diferencias significativas (P menor 0,01) en la distribución de estas subpoblaciones en todas las especies sobretodo en caballos y en conejos. Sin embargo, no existió una relación clara entre las subpoblaciones espermáticas y la fertilidad "in vivo" del semen. Por otra parte, la estimación precisa de la capacidad fecundante del eyaculado de mamíferos sería muy útil para la optimización de las técnicas de reproducción asistida. Con este propósito, se planteó el segundo objetivo de este estudio, que fue determinar la posibilida de usar la combinación matemática de varios parámetros de calidad seminal en semen de cerdo y conejo, incluyendo el CASA. En cerdo, dos modelos matemáticos obtenidos por regresión logística seleccionaron el test de resistencia osmótica, el test de resistencia hiperosmótica y la viabilidad espermática como los parámetros que mejor predicen la tasa de concepción (P menor 0.05). Sin embargo, ninguno de los modelos hechos por regresión lineal se realacionó con la prolificidad. En conejo, las regresiones logísticas y lienal proporcionaron dos moelos matemáticos significativos (P menor 0.05) que seleccionaron la viabilidad y las anormalidades espermáticas como los parámetros de mayor predicción de la fertilidad y la prolificidad. En caballos, los eyaculados con al menos una fertilidad confirmada presentaron espermatozoides con gran linealidad y progresividad. Además, la totalidad de las muestras fértiles presentaban un número total de espermatozoides por eyaculado superior a 20 x 10 9. Nuestras observaciones respaldan la opinión de que la utilización predictiva de los resultados obtenidos en el análisis de semen de estos mamíferos puede conseguirse en forma razonable mediante la aplicación de análisis de regresión que permitan relacionar todos los parámetros de calidad seminal evaluados en cada especie. Así, la metodología empleada explica sistemáticamente la calidad del semen de mamíferos, además de relacionarla con la tasa de concepción obtenida de la inseminación artificial y la prolificidad en los mamíferos evaluados.
  • SELECCIÓN DE OVOCITOS EN LA ESPECIE EQUINA .
    Autor: MARTINEZ ASENSIO FELISA.
    Año: 2003.
    Universidad: ZARAGOZA .
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD VETERINARIA.
  • PRODUCCIÓN DE EMBRIONES BOVINOS A PARTIR DE OVARIOS DE MATADERO: MEDIOS, SISTEMAS DE INCUBACIÓN Y PRESERVACIÓN .
    Autor: GONZALEZ ORTI NOELIA.
    Año: 2003.
    Universidad: ZARAGOZA.
    Centro de lectura: VETERINARIA .
    Centro de realización: FACULTAD VETERINARIA.
    Resumen: A lo largo del trabajo se realizaron 4 experiencias. En la primera se compararon 3 medios de lavado y maduración: TCM 199, TALP hipotónico y TALP isotónico. El TCM 199 resultó significativamente mejor. En una segunda experiencia se confirmó el efecto beneficioso de Abeta-entradiol sobre los lavados previos a la maduración. Además se compararon 2 sistemas de aspiración folicular. El manual o con bomba de succión, resultando significativamente mejor el primero. En una tercera experiencia se compararon varios sistemas de cultivo embrionario, la estufa incubadora, el sistema de incubación submarino y las bolsas gaseadas dentro de la estufa incubadora. Hubo diferencia significativa entre los 3 sistemas a nivel de todos los estadios de desarrollo valorados. El mejor fueron las bolsas gaseadas, seguido del incubador submarino y en último lugar la estufa. Finalmente, en la cuarta experiencia se comparan 2 protocolos de vinificación ovocitaria: para ovocitos inmaduros y para ovocitos maduros. Los últimos ofrecieron mejores resultados, aunque no fueron significativamente diferentes. Todo el trabajo se apoyó en una revisión bibliográfica en la que se hacia referencia a todos los temas relacionados. También se describen detalladamente el material y métodos utilizados.
  • ESTUDIO DE LOS PARÁMETROS REPRODUCTIVOS DEL PUYE (GALAXIAS MACULATUS, JENYNS, 1842) (OSMERIFORMES: GALAXIIDAE) BAJO CONDICIONES DE CULTIVO EXPERIMENTAL EN EL SUR DE CHILE.
    Autor: VALDEBENITO ISLER NEMESIO IVÁN.
    Año: 2003.
    Universidad: LAS PALMAS DE GRAN CANARIA.
    Centro de lectura: CIENCIAS DEL MAR.
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS DEL MAR.
    Resumen: El objetivo de la presente tesis es estudiar algunos parámetros reproductivos del puye (Galaxias maculatus) en condiciones de cultivo experimental en el Sur de Chile, determinando su longevidad, tipo y frecuencia de desoves, fecundidad, características de los gametos, patrones de movilidad espermática y composición de diluyentes espermáticos. Además, determinar el efecto de baños hormonales de LH-Rha en el porcentaje de hembras ovuladas y en la calidad de sus gametos. Para el logro de los objetivos se mantuvo en condiciones de cultivo experimental una población silvestre de puye por más de cuatro años, además, de sus descendientes hasta la tercera generación. Para la caracterización de los gametos se utilizaron técnicas de microscopía óptica y electrónica. La caracterización de los patrones de movilidad espermática se realizó con especímenes que alcanzaron su madurez sexual en cautiverio, así como también para la evaluación in vivo de oocitos y espermatozoides, determinando el efecto en la calidad de los gametos del almacenamiento, la temperatura y salinidad. Los resultados muestran que el puye es una especie iterópara con una longevidad de cuatro años. Su mayor peso y longitud fueron de 3.5 +- 0.17 g y 80.1+- 4.2mm, respectivamente. Alcanza su pubertad después de un año de edad y presenta un ciclo reproductivo anual asociado con el termo y fotoperiodo, con una marcada actividad de puestas durante el inicio de primavera. Su madurez sexual es asincrónica por grupos, realizando varios desoves en cada temporada reproductiva. El Índice Gonadosomático alcanza un valor máximo en las hembras de 17.74 +- 2.96 y en machos a 9.72 +- 2.12. La fecundidad Total promedio fue de 649.62+- 342.39 oocitos por hembra y la Fecundidad Relativa de 391.23 +- 87.38 oocitos por gramo de hembra. El espermatozoide de puye presenta una longitud total promedio de 24.0um, carece de acrosoma y presenta un profundo canal endonuclear. La pieza media está constituida por una mitocondria. El oocito tiene un diámetro promedio de 1.07 +- 0.05mmm después de la hidratación, presenta además, una capa adhesiva de 0.14 +- 0.01mm de grosor que atravesada por sólo un micropilo.
  • TÉCNICAS DE CONTROL DE LA REPRODUCCIÓN DE LA TENCA (TINCA TINCA L.) EN CONDICIONES DE LABORATORIO Y DE CULTIVO .
    Autor: RODRÍGUEZ BRISO-MONTIANO RUTH.
    Año: 2002.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: VETERINARIA .
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: En este estudio se han desarrollado métodos de control de la reproducción de la tenca (Tinca tinca L.). A lo largo de cinco años consecutivos se han realizado 24 experimentos, utilizando 1778 reproductores y 51 millones de huevos. Se han determinado las condiciones adecuadas para el desarrollo gonadal y maduración de reproductores en condiciones de laboratorio y de cultivo, así como el periodo en que es posible disponer de machos productores de semen. Se han valorado diferentes sistemas de incubación artificial, tanto en flujo continuo como sin renovación de agua. Se han estudiado el desarrollo embrionario y larvario y establecido su cronología a dos temperaturas diferentes, determinando las fases críticas durante el proceso de incubación artificial. Se han ensayado diversos métodos para reducir la adherencia de los huevos tras la fecundación artificial, definiendo los más eficaces, rápidos y fácilmente aplicables en condiciones de cultivo. Se ha determinado la eficiencia de los sistemas de incubación, estableciendo valores intermedios que sirvan de referencias a niveles de cultivo.
  • CRIOPRESERVACIÓN DE SEMEN PORCINO: APORTACIONES AL ESTUDIO DE LA CALIDAD SEMINAL Y LA CAPACIDAD FECUNDANTE .
    Autor: PELÁEZ GARCÍA DE LA PUERTA JESÚS.
    Año: 2002.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: VETERINARIA .
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: El presente trabajo fue llevado a cabo con objeto de evaluar la calidad seminal de un banco de esperma congelado, elaborado para la empresa de genética porcina Desarrollo Ganadero Español, S.A. (DEGESA JSR), en virtud de los acuerdos de colaboración establecidos entre dicha firma y la Unión Docente "Reproducción y Obstetricia" del Departamento de Patología Animal (Sanidad Animal) de la Universidad de León. Se utilizó un método optimizado de cripreservación espermática, y se profundizó en el estudio de tres objetivos fundamentales: posibilidades de obtener semen congelado de buena calidad y capacidad fecundante, capacidad que tienen determinados parámetros de contrastación seminal para expresar diferencias de calidad, y fiabilidad de la calidad seminal como criterio indicativo de capacidad fecundante. En líneas generales, se evaluó la idoneidad del esperma para ser utilizado en inseminación artificial, y se pretendió identificar queé aspecto cualitativo o funcional resulta crítico para la capacidad fecundante. El banco de esperma incluía un total de veintidós eyaculados, recogidos de once verracos, y la congelación se llevó a cabo en pajuelas de 0,25 mL utilizando una curva trifásica de enfriamiento. Se analizó la calidad seminal, la capacidad de termorresistencia, y la capacidad fecundante in vitro e in vivo. En el estudio de la calidad seminal, se evaluó el porcentaje de espermatozoides mótiles y la calidad del movimiento, sin y con estimulación por cafeína, el porcentaje de espermatozoides con membrana plasmática íntegra utilizando los fluorocromos yoduro de propidio y Hoechst 33258, y el porcentaje de espermatozoides con acrosoma normal utilizando el fluorocromo FITC-PSA. El test de termorresistencia contempló la incubación del semen a 37ºC durante 4h, evaluándose, a intervalos de una hora, la vitalidad y la motilidad. Para la evaluación in vitro de la capacidad fecundante, se utilizó un test homógolo de fecundación in vitro, estudiándose el porcentaje de ovocitos maduros penetrados, el porcentaje de penetraciones polispérmicas y el promedio de espermatozoides por ovocitos penetrado. Se analizaron diferencias individuales de capacidad fecundante entre oyaculados, así como el grado en que la criopreservación mermó dicha capacidad fecundante (para lo que se utilizaron muestras de semen refrigerado a efectos comparativos), y la contribución de la supervivencia espermática al mantenimiento de dicha capacidad, en lo que desarrollaría un papel determinante el status de capacitación, y para lo que se utilizaron, también, muestras de semen refrigerado a efectos comparativos. En el estudio de la fertilidad in vivo, finalmente, se inseminaron veintiuna cerdas con dosis de buena calidad, evaluándose la fecundidad, la fertilidad, y la prolificidad. Se encontró que el porcentaje de espermatozoides mótiles bajo estimulación por cafeína, y el porcentaje de espermatozoides vivos valorado con el fluorocromo yoduro de propidio, estimaban la calidad seminal de forma más precisa que el resto de parámetros analizados, pero el seguimiento de la motilidad espermática a lo largo de un período de incubación a 37ºC contribuía en mayor medida a establecer diferencias de calidad. Considerando exclusivamente la vitalidad y la motilidad espermática a la descongelación, el protocolo de criopreservación seminal utilizado nos permitió obtener excelentes resultados de calidad (valores para cualquier de los dos parámetros anteriores próximos o superiores al 50%) en un porcentaje considerablemente elevado de los eyaculados procesados (=86,36), si bien, factores ajenos a las condiciones de congelación-descongelación influyeron en la criorresistencia del espermatozoide. La capacidad fecundante in vitro demostró ser variable entre eyaculados, y no necesariamente relacionada con la criorresistencia, viéndose seriamente afectada por el proceso de criopreservación en cualquier caso, a causa de un extremadamente acelerado fenómeno de capacitación. Este hecho limita entonces las posibilidades de utilización del banco de esperma congelado en inseminación artificial, como quedó comprobado en el estudio de la capacidad fecundante in vivo, y relega a un segundo plano las repercusiones favorables del método de criopreservación sobre la calidad seminal, haciendo de la modificación del status de capacitación el aspecto prioritario a resolver.
  • ESTUDIO DE FECUNDACIÓN IN VITRO EN PORCINO: REDUCCIÓN DE LA POLIESPERMIA Y OPTIMIZACIÓN DE LA PRODUCCIÓN IN VITRO DE EMBRIONES .
    Autor: MARTINEZ MADRID BELÉN.
    Año: 2002.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: En los últimos años se han logrado progresos considerables en el desarrollo de los procedimientos de MIV, FIV y cultivo embrionario. Aunque los sistemas de producción in vitro disponibles son aptos para la generación de embriones porcinos, sigue sin resolverse el problema de la elevada poliespermia y de la baja capacidad de desarrollo de los embriones porcinos. El presente trabajo se llevó a cabo con el objetivo de reducir la poliespermia e incrementar el desarrollo embrionario preimplantacional, mejorando de este modo el rendimiento de la técnica de producción in vitro establecida en nuestro laboratorio. Para alcanzar este objetivo, se incoroporaron una serie de modificaciones a nuestro sistema de producción de embriones, abarcando todas las fases que constituyen la técnica: MIV, FIV y cultivo embrionario. El medio de MIV fue modificado, complementándolo con EGF o FPF. La adición de EGF permitió mejorar la maduración citoplasmática de los ovocitos, la monospermia y el desarrollo embrionario. Posteriormente, se valoró la modificación de tres de los principales componentes del sistema de FIV: el medio de fecundación, la concentración espermática y el método de cocultivo de los ovocitos con los espermatozoides. La combinación de medio de fecundación TBMm y de concentración espermática de 1x10(6) espermatozoides. La combinación de medio de fecundación TBMm y de concentración espermática de 1x10(6) espermatozoides/mL fue con la que se logró un mejor equilibrio entre el porcentaje de penetración y el de poliespermia. Además, la incorporación del método de cocultivo en dos pasos dio lugar a una notable reducción en la tasa de poliespermia. Finalmente, se evaluó la complementación del medio de cultivo de embriones con aminoácidos esenciales y no esenciales y la reducción del volumen de cultivo, lográndose con estas dos modificaciones incrementar en el desarrollo embrionario. Gracias al conjunto de las modificaciones incorporadas a nuestro sistema inicial de producción in vitro de embriones se consiguió mejorar de manera global el rendimiento de la técnica. De este modo, la maduración citoplasmática, valorada como el porcentaje de formación de pronúcleo masculino, se vió incrementada de un 73,6% a un 93,6%; el porcentaje inicial de penetración aumentó de un 53,2% a un 66,6%; la poliespermia se redujo de un 47,4% a un 36,2%; y el desarrollo embrionario hasta el estadio de blastocisto mejoró desde un porcentaje del 1% hasta el 28,9%. Los resultados obtenidos confirman que el limitado desarrollo hasta blastocisto de los embriones porcinos producidos in vitro no se debe a un fallo puntual en la técnica, sino a la combinación de una maduración citoplasmática inadecuada o incompleta, una elevada poliespermia, una formulación inadecuada de los medios de cultivos y unas condiciones de cultivo embrionario subóptimas. El incremento en el rendimiento final de la técnica que hemos alcanzado nos permitirá disponer de un mayor número de embriones así como de ovocitos maduros, para ser empleados en futuros estudios.
  • ESTUDIO DE LOS EFECTOS DEL CULTIVO Y LA CONGELACIÓN EN LA VIABILIDAD DE EMBRIONES OVINOS EN ESTADIOS PREVIOS A LA COMPACTACIÓN .
    Autor: GARCÍA GARCÍA ROSA M..
    Año: 2002.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: Los sistemas basados en la producción y conservación in vitro de embriones son ampliamente utilizados hoy en día, a pesar de que sus rendimientos son aún bajos. Una solución para aumentar la eficacia reproductiva utilizando estos procedimientos, sería la congelación de embriones en estadios tempranos, ya que se evitarían las posibles pérdidas asociadas al cultivo; si bien esta es una técnica imprescindible en los sistemas de producción in vitro. Por ello, en este trabajo, hemos definido las condiciones óptimas para llevar a cabo el cocultivo de embriones en estadios comprendidos entre 2 y 12 células, con monocapas de células epiteliales de oviducto, mediante la evaluación del efecto de la edad de la monocapa y de la conservación por congelación de las células somáticas. Así mismo, hemos estudiado las pérdidas de supervivencia a la congelación que se provocan por el cultivo prolongado, y el rendimiento de la congelación de embirones en etapas iniciales, o por el contrario es más adecuado cultivar los embriones hasta el estadio de blastocito antes de ser congelados. Finalmente, puesto que la concentración de sacarosa más utilizada en la retirada del crioprotector, en la congelación clásica, puede ser un factor de influencia en la supervivencia de distintos estadios, ya que la permeabilidad de los embriones varía a lo largo del desarrollo preimplantacional, hemos analizado el efecto de dos concentraciones distintas de esta macromolécula. El análisis estadístico de nuestros resultados ha puesto de manifiesto que la edad de la monocapa no influye sobre el desarrollo de embriones en estadios iniciales, ni tampoco la congelación de las células ejerce influencia sobre la tasa de blastociotos. Los resultados de desarrollo hasta blastocitos registrados permiten afirmar que las monocapas de células congelados, sembradas dos días antes del inicio del cultivo, posibilitan la homogoneización del sistema, proporcionando un rendimiento del cultivo uniforme y elevado (83,2%), que incrementa a medida que avanza la etapa de partida del embrión. En este estudio se ha observado un efecto significativo del cultivo en la supervivencia a la congelación, que únicamente ha sido significativo individualmente, en el grupo de blastocistos de cultivo obtenidos a partir de embriones de 1 a 4 células. Además, se ha detectado que la supervivencia post-descongelación está afectada por el tiempo que emplea cada estadio en llegar a blastocisto. Dada la escasa resistencia intrínseca de estas fases iniciales, se puede indicar que es más beneficioso cultivar los embriones de estados tempranos hasta blastocisto y congelar en ese estadio, que hacerlo tras la obtención, a pesar de que el cultivo disminuya la supervivencia a la congelación. El estudio del desarrollo post-descongelación de embriones desde 2 celúlas hasta blastocisto, pone de manifiesto que la resistencia a la congelación aumenta paulatinamente, siendo muy evidente el efecto del estadio (p menor que 0,0001); por esto, en nuestras condiciones de trabajo, el blastocisto es el estadio con el que se alcanzan los mejores rendimientos in vitro. Por último, los resultados obtenidos en la valoración del efecto de la concentración de sacarosa sobre la retirada del crioprotector, mediante la comparación de dos concentraciones distintas, 0,25 y 1M, no muestran una influencia significativa sobre la supervivencia post-descongelación a lo largo del desarrollo preimplantacional embrionario. Así mismo, tampoco se ha observado efecto de esta variable en la supervivencia de los blastocistos de cultivo con respecto a la de los blastocistos control, si bien la interacción concentración de sacarosa-cultivo alcanzó significación estadística lo que pone de manifiesto que la concentración de sacarosa empleada en la retirada del crioprotector, afecta de distinto modo a la supervivencia de cada uno de los grupos de blastocistos originados en cultivo.
  • INFLUENCIA DE DISTINTOS FACTORES ENDÓGENOS Y EXÓGENOS SOBRE LOS PARÁMETROS REPRODUCTIVOS EN HEMBRAS BOVINAS DE RAZA RUBIA GALLEGA .
    Autor: BECERRA GONZÁLEZ JUAN JOSÉ.
    Año: 2002.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: VETERINARIO.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: A lo largo del último siglo, la raza Rubia Gallega, ha experimentado un continuo proceso de slección, que la ha llevado de ser una raza de triple aptitud a convertirse en una raza especializada en la producción de carne. Sin embargo todos los esfuerzos realizados en la mejora de los caracteres productivos, a través de la Asociación de Criadores y del MAPA, no se han visto acompañados, en la misma medida, de incrementos del rendimiento reproductivo. Por todo ello, en este trabajo hemos tratado de evaluar aspectos ligados a la reproducción en esta raza, así como los factores que los podrían condicionar en mayor o menor medida. Para ello, hemos recogido datos reproductivos de 1412 vacas durante los años comprendidos entre 1992 y 1998, estos animales estaban distribuidos en 217 ganaderías. En total hemos controlado 3.002 gestaciones completas, correspondientes a hembras inscritas en los Libros Genealógicos de la Raza Rubia Gallega. En primer lugar se ha intentado evaluar las características reproductivas de las hembras de esta raza, analizando para ello los parámetros: Edad al primer parto, Duración de la Gestación y Peso al nacimiento. También se ha valorado la eficiencia reproductiva de esta raza en condiciones de explotación típicas, estableciéndose los intervalos parto primera inseminación y parto gestación y entre partos, así como el número de inseminaciones necesarias para conseguir la gestación y la eficacia de la detección de celos. Finalmente se ha estudiado la dificultad de parto existente en la raza. Además se han analizado qué factores podrían afectar a estos parámetros. Nuestros resultados indican que la edad al primer parto en los animales de esta raza se sitúa en los 27,81+-4,71 meses. Esta cifra está condicionada por el número de inseminaciones necesarias para conseguir esta primera gestación, así como por el año de nacimiento y por la localización geográfica de la explotación a la que pertenece. La duración media de la gestación en la Raza Rubia Gallega es de 291,41+-7,51 días, siendo más prolongada que en las restantes razas europeas de aptitud cárnica. Los factores que mostraron mayor influencia sobre este valor son el peso del ternero al nacimiento, la estación de parto, el toro empleado en la inseminación y el padre de la vaca. El peso al nacimiento medio fue 46,38+-8,96 Kg, condicionado por factores como el sexo de la cría, la edad de la vaca, la duración de la gestación, las líneas paternales y la estación en la que se produjo el parto. El Intervalo entre partos en los animales de este estudio fue de 409,52+-61,88 días, y estaba condicionado principalmente por la duración del intervalo parto gestación, y en un menor medida por algunas condiciones ambientales como la localización geográfica y la estación de parto. El valor obtenido para el intervalo parto gestación fue similar a los observados en otras razas de aptitud cárnica que amamantan a sus crías (117,68+-61,47 días). Este parámetros estaba afectado por el número de inseminaciones por gestación, por el intervalo parto primera inseminación, y por factores medioambientales y de manejo: explotación, año y estación. En los animales objeto de estudio el intervalo trascurrido entre el parto y la primera inseminación fue ligeramente superior al valor considerado óptima en las explotaciones de ganado vacuno de aptitud cárnica (86,68+-35,30 días), y estaba fuertemente influenciado por las condiciones medioambientales y de manejo a las que eran sometidos los animales. El número medio de inseminaciones necesario para conseguir una gestación en los animales empleados en el presente estudio fue de 1,75+-1,17 inseminaciones. Este parámetro se vio condicionado por las siguientes variables: edad de la vaca, año de inseminación, intervalo parto primera inseminación, estación, padre de la vaca y localización geográfica de los animales. La detección de celos en las explotaciones incluidas en el estudio fue bastante deficiente (intervalo entre celos: 37,70+-28,47 días). Este problema los atribuimos al escaso tiempo dedicado a la observación de los animales. Así, la detección de celos mejora en aquellas estaciones del año y en aquellos ayuntamientos en los que existe una mayor posibilidad de observación. El 6,5% de los partos del estudio fueron considerados distócicos. Con el modelo estadístico utilizado hemos conseguido predecir de forma correcta el 99,01% de los animales que presentarían partos eutócicos, pero tan sólo el 37,01% de los distócicos. La aparición de distocias esta condicionada por: cuestiones genéticas (toro empleado, padre de la vaca), sexo del recién nacido, peso al nacimiento y por la edad de la hembra.
  • MEJORA DE LA OBTENCIÓN DE OVOCITOS Y SU EVALUACIÓN METABÓLICA PARA LOS PROGRAMAS DE FECUNDACIÓN IN VITRO DE LA ESPECIE OVINA .
    Autor: RODRÍGUEZ CONCHA CRISTINA.
    Año: 2002.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: La producción in vitro de embriones presenta múltiples ventajas y su éxito depende en parte de la eficiencia en los métodos de obtención de ovocitos o la mejora de los métodos de selección de ovocitos. Para optimizar las técnicas de obtención de ovocitos se estudiaron, en postmortem, el dispositivo de aspiración, la eficacia de la aspiración selectiva por tamaño folicular y la capacidad de desarrollo in vitro de ovocitos procedentes de distintos tamaños de folículo. Además se estudió la eficacia de distintas técnicas de abordaje laparoscópico (obtención in vivo) que variaban en el número de punciones abdominales, así como la aspiración selectiva por tamaño de folículo in vivo. Con el bojeto de mejorar la selección de ovocitos se realizó un estudio morfológico y morfométrico de los ovocitos y pruebas de metabolismo celular mediante marcaje con isótopos radiactivos. El dispositivo de aspiración que obtiene el mayor número de ovocitos de buena calidad respecto a los folículos puncionados (40-50%) es de flujos de aspiración bajos (10-20 ml/min) y conducciones de grosor fino (1 mm de diámetro interno), no importando el calibre de la aguja. Los ovocitos de folículos mediantos (3-5 mm diámetro) y grandes (>5 mm diámetro) tienen mejor calidad morfológica (ovocitos válidos/100 folículos puncionados: 27,42 y 63% para folículos pequeños, medianos y grandes, respectivamente) y tasas de maduración superiores que los folículos de tamaño pequeño (75,83 y 86% en folículos pequeños, medianos y grandes, respectivamente). La técnica ideal según el número de punciones abdominales para el acceso laparoscópico en función del número de ovocitos respecto a folículos reales (45,7%) y de los tiempos de aspiración por folículo (26,2 segundo) es la que utiliza tres punciones. Los valores obtenidos para una, dos y cuatro punciones son 16,9, 36,3 y 38,6% ovocitos respecto a folículos presentes en el ovario, con tiempos de aspiración por folículo de 116,2, 31,1 y 25,0 segundos, respectivamente. En cuanto a la valoración de ovocitos previa a su cultivo, los ovocitos ovinos miden 132,6 um sin pelúcida, 154,4 um con pelúcida y tienen un grosor de pelúcida de 114,4 um sin importar el tipo de ovocito, el tamaño del folículo o la edad de la donante. Por último, las pruebas metabólicas aportan información básica del metabolismo del ovocito ovino. La incorporación de glucosa no varía entre ovocitos inmaduros o maduros, con valores de 4,2 pmol/ovocito/h. El metabolismo oxidativo de glucosa es mayor en ovocitos maduros que inmaduros y descienden a medida que aumenta el tiempo de cultivo, con valores de 0,22 a 1,18 pmol/ovocito/h para ovocitos inmaduros y maduros, respectivamente. Las pruebas metabólics de glucosa y glutamina muestran que los ovocitos maduros e inmaduros tienen más afinidad por la glutamina que por la glucosa, con valores de 2,10 y 0,11 pmol/ovocito/h para marcaje con glutamina y glucosa, respectivamente. El metabolismo de la glucosa marcada en ciertos carbonos con 14C y 3H para determinar las rutas metabólicas muestra que los ovocitos inmaduros utilizan más la ruta de las pentosas fosfato y la glucólisis ([1- 14C] Glucosa y [5- 3H] Glucosa) y los ovocitos maduros la ruta de los ácidos tricarboxílicos ([6- 14C] Glucosa), surgieriendo que los ovocitos inmaduros emplean la glucosa en metabolismo anabólico y los ovocitos maduros producen más energía.
119 tesis en 6 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6
Búsqueda personalizada
Manuales | Tesis: Ordenadores, Circuitos integrados...
english
Cibernetia